公开(公告)号：CN119101705B

公开(公告)日：2025-04-15

申请号：CN202411596243.6

申请日：2024-11-11

Applicant: 细胞生态海河实验室 ,  中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 王璐 ,  董振坤 ,  王思锋

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  A01K67/0276

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种斑马鱼trmt61a母源合子突变体的制备方法，包括如下步骤：将靶向斑马鱼trmt61a基因的sgRNA和Cas9蛋白共同注射到野生型斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到trmt61a杂合合子突变体；构建pGGDestISceIEG‑4sgRNA质粒，将其与内切酶和反应缓冲液共同注射到Tg(zpc:zcas9)转基因斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到成年斑马鱼F0代；使成年斑马鱼F0代的雌性鱼与trmt61a杂合合子突变体雄鱼杂交，得到斑马鱼trmt61a母源合子突变体。该方法突破了trmt61a基因纯合突变致死的限制，实现快速制备母源合子突变体。

公开(公告)号：CN119101705A

公开(公告)日：2024-12-10

申请号：CN202411596243.6

申请日：2024-11-11

Applicant: 细胞生态海河实验室 ,  中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 王璐 ,  董振坤 ,  王思锋

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  A01K67/0276

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种斑马鱼trmt61a母源合子突变体的制备方法，包括如下步骤：将靶向斑马鱼trmt61a基因的sgRNA和Cas9蛋白共同注射到野生型斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到trmt61a杂合合子突变体；构建pGGDestISceIEG‑4sgRNA质粒，将其与内切酶和反应缓冲液共同注射到Tg(zpc:zcas9)转基因斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到成年斑马鱼F0代；使成年斑马鱼F0代的雌性鱼与trmt61a杂合合子突变体雄鱼杂交，得到斑马鱼trmt61a母源合子突变体。该方法突破了trmt61a基因纯合突变致死的限制，实现快速制备母源合子突变体。