公开(公告)号：CN103981200B

公开(公告)日：2017-07-14

申请号：CN201410231232.8

申请日：2014-05-29

Applicant: 福建省农业科学院中心实验室

Inventor： 吕新 ,  李玥仁 ,  陈丽华 ,  刘兰英 ,  李巍

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64

Abstract: 本发明涉及基因工程领域中一种载体构建的方法，具体为一种基于TaqDNA聚合酶的末端转移酶活性构建T载体的方法。主要利用Taq DNA聚合酶末端转移酶活性在线性化平末端出发载体的3′‑端添加T，然后利用T4 DNA连接酶去除3′‑端未加T载体自身环化背景，获得3′‑端具有单个T突出的线性T载体。本发明获得的T载体质量稳定，自身环化背景低，克隆效果好，不但适用于小规模制备，也适用于大规模生产，将在基因工程领域发挥重要作用。

公开(公告)号：CN103981274A

公开(公告)日：2014-08-13

申请号：CN201410240472.4

申请日：2014-05-30

Applicant: 福建省农业科学院中心实验室

Inventor： 吕新 ,  陈丽华 ,  李玥仁 ,  刘兰英 ,  李巍

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种重组菌落快速检测试剂及其快速检测方法，专用于基因克隆中阳性重组菌落的快速检测，属于分子生物学技术领域。快速检测试剂包括：试剂A（悬浮液）、试剂B(裂解液)；快速检测方法包括：待检测菌落悬浮混匀、待检测菌落裂解、电泳检测和判断。所发明的快速检测试剂及其快速检测方法可被用于基因克隆中阳性重组菌落的快速检测，特别在大量筛选阳性重组菌落时将大幅减少筛选的时间和实验成本，具有操作简便、方法快速、结果可靠的优点，能在1小时内完成待检测菌落的快速检测和判断，且检测过程中不需要X-gal和IPTG等昂贵试剂，结果准确性高于PCR法，检测时间比常规限制性酶切法大幅减少。

公开(公告)号：CN103981200A

公开(公告)日：2014-08-13

申请号：CN201410231232.8

申请日：2014-05-29

Applicant: 福建省农业科学院中心实验室

Inventor： 吕新 ,  李玥仁 ,  陈丽华 ,  刘兰英 ,  李巍

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64

Abstract: 本发明涉及基因工程领域中一种载体构建的方法，具体为一种基于TaqDNA聚合酶的末端转移酶活性构建T载体的方法。主要利用TaqDNA聚合酶末端转移酶活性在线性化平末端出发载体的3′-端添加T，然后利用T4DNA连接酶去除3′-端未加T载体自身环化背景，获得3′-端具有单个T突出的线性T载体。本发明获得的T载体质量稳定，自身环化背景低，克隆效果好，不但适用于小规模制备，也适用于大规模生产，将在基因工程领域发挥重要作用。