一种土壤微生物cDNA文库的构建方法

    公开(公告)号:CN102418151A

    公开(公告)日:2012-04-18

    申请号:CN201110277886.0

    申请日:2011-09-19

    Abstract: 本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法,本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA,单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接,再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应,反应后的cDNA的3’端与接头2连接,获得5’、3’端分别连接有接头的cDNA,采用与接头部分序列互补的寡核苷酸作为引物对cDNA进行扩增,从而获得土壤微生物的双链cDNA,将此双链cDNA与克隆载体pMD-18T连接后转化大肠杆菌感受态细胞,最终获得土壤微生物的cDNA文库。本发明构建的土壤微生物cDNA文库库容量较大,可以用来筛选感兴趣的目的基因,以及后续的基因、蛋白互作分析。

    一种富含γ-氨基丁酸萌芽糙米的生产方法

    公开(公告)号:CN101380075A

    公开(公告)日:2009-03-11

    申请号:CN200810071997.4

    申请日:2008-10-27

    Abstract: 本发明涉及一种富含γ-氨基丁酸萌芽糙米的生产方法,包括选料、湿式清理、浸泡、催芽水洗、微波干燥成品5个工艺流程,采用的设备、工艺;以佳福占为原料,平均萌芽糙米得率在85%以上,萌芽糙米的γ-氨基丁酸含量达125mg/100g。比常规采用的籼稻品种得率60%左右高出22%;γ-氨基丁酸含量比常规籼稻品种获得的58%左右高45%。大幅度地降低了生产成本,提高了产品的品质。

    萌芽糙米袋泡茶的生产方法

    公开(公告)号:CN101385494A

    公开(公告)日:2009-03-18

    申请号:CN200810071998.9

    申请日:2008-10-27

    Abstract: 本发明属于涉及一种富含γ-氨基丁酸方便食用的萌芽糙米袋泡茶的生产方法;其以富含γ-氨基丁酸的萌芽糙米为原料,经过120℃烘干后,粉碎至粒度20-40目,装入透出力小于100目的泡袋内,封口即为成品。其在装袋前还可添加25%茶末或香精香料或乙基麦芽酚等制成不同口味的产品。该方法生产的产品的粒度大小合适,产品耐泡、品味好,且方便食用。

    一种土壤微生物cDNA文库的构建方法

    公开(公告)号:CN102418151B

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201110277886.0

    申请日:2011-09-19

    Abstract: 本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法,本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA,单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接,再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应,反应后的cDNA的3’端与接头2连接,获得5’、3’端分别连接有接头的cDNA,采用与接头部分序列互补的寡核苷酸作为引物对cDNA进行扩增,从而获得土壤微生物的双链cDNA,将此双链cDNA与克隆载体pMD-18T连接后转化大肠杆菌感受态细胞,最终获得土壤微生物的cDNA文库。本发明构建的土壤微生物cDNA文库库容量较大,可以用来筛选感兴趣的目的基因,以及后续的基因、蛋白互作分析。

    一种土壤微生物基因组DNA和总RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN101974513B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN201010548527.X

    申请日:2010-11-18

    Abstract: 本发明提供一种有效提取作物根际土壤微生物基因组DNA和总RNA的方法,包括将土壤样品先用硫酸铝去除腐殖质等严重干扰核酸提取的杂质,进一步用玻璃珠破碎土壤微生物细胞,再加入SDS及LiCl溶液裂解细胞、游离核酸,加入酚、氯仿和异戊醇混合物萃取后,萃取液用异丙醇及醋酸钠沉淀,最终获得土壤微生物宏基因组DNA和总RNA。本方法适用于不同地域土壤DNA和总RNA的提取,建立了一种操作流程的简易,制备样品纯度较高的提取技术,能够为土壤宏基因组学研究提供重要基础。

    一种水稻超干种子的生产方法

    公开(公告)号:CN101816230B

    公开(公告)日:2011-11-30

    申请号:CN201010187987.4

    申请日:2010-06-01

    Abstract: 本发明提供了一种水稻超干种子生产方法,以含水量≤15%的水稻种子为材料,进行高温加温干燥,得到水稻超干种子;所述水稻超干种子含水量为5%-7%及以下;所述的高温加温干燥为45℃-80℃条件下恒温加热或连续的在45℃至80℃温度范围内逐渐升高的变温加热干燥过程或者采用两个阶段不同温度的加温干燥。本发明的水稻超干种子的生产方法,生产的水稻超干种子含水量最低可以低至5%以下而不明显影响其生活力,且生产成本低,可以使水稻种子在室温条件下密闭贮藏较长时间而发芽率无明显降低。还可以减少仓库清仓、消毒、通风、治虫、防霉等整治及维护工作和贮藏成本,使种子的贮藏工作事半功倍。

    一种土壤微生物基因组DNA和总RNA的提取方法

    公开(公告)号:CN101974513A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010548527.X

    申请日:2010-11-18

    Abstract: 本发明提供一种有效提取作物根际土壤微生物基因组DNA和总RNA的方法,包括将土壤样品先用硫酸铝去除腐殖质等严重干扰核酸提取的杂质,进一步用玻璃珠破碎土壤微生物细胞,再加入SDS及LiCl溶液裂解细胞、游离核酸,加入酚、氯仿和异戊醇混合物萃取后,萃取液用异丙醇及醋酸钠沉淀,最终获得土壤微生物宏基因组DNA和总RNA。本方法适用于不同地域土壤DNA和总RNA的提取,建立了一种操作流程的简易,制备样品纯度较高的提取技术,能够为土壤宏基因组学研究提供重要基础。

    一种水稻超干种子的生产方法

    公开(公告)号:CN101816230A

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN201010187987.4

    申请日:2010-06-01

    Abstract: 本发明提供了一种水稻超干种子生产方法,以含水量≤15%的水稻种子为材料,进行高温加温干燥,得到水稻超干种子;所述水稻超干种子含水量为5%-7%及以下;所述的高温加温干燥为45℃-80℃条件下恒温加热或连续的在45℃至80℃温度范围内逐渐升高的变温加热干燥过程或者采用两个阶段不同温度的加温干燥。本发明的水稻超干种子的生产方法,生产的水稻超干种子含水量最低可以低至5%以下而不明显影响其生活力,且生产成本低,可以使水稻种子在室温条件下密闭贮藏较长时间而发芽率无明显降低。还可以减少仓库清仓、消毒、通风、治虫、防霉等整治及维护工作和贮藏成本,使种子的贮藏工作事半功倍。

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