-
公开(公告)号:CN119932232A
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202510374890.0
申请日:2025-03-27
Applicant: 福州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12N15/113 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测SARS‑CoV‑2冠状病毒核酸的探针组及应用,属于生物检测领域。所述的检测SARS‑CoV‑2冠状病毒核酸的crRNA序列为以下任意一种:针对S基因的LbucrRNA1、LbucrRNA2、LbucrRNA3、LbucrRNA4,针对突变株EG.5.1.1的N基因的N1crRNA、N2crRNA,序列如序列表所示。本发明基于LbuCas13a蛋白的切割游离RNA和靶向特定RNA序列的能力,以胶体碳免疫层析试纸条为可视化检测方式,建立了一种免疫层析Cas13a核酸检测的方法,该方法可在90 min内完成对SARS‑CoV‑2冠状病毒的快速检测,为疾病防控提供了一种新的简便快捷的检测方法,并且该方法操作简单,无需大型仪器设备的辅助。
-
公开(公告)号:CN115786299A
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202211456547.3
申请日:2022-11-21
Applicant: 福州大学 , 福建医科大学附属第一医院
Abstract: 本发明公开了逆转录酶大规模生产时降低包涵体的方法。所述方法包括以下步骤:1将携带有目的基因的菌种划线于带抗性的LB平板上,挑取单菌落培养后作为种子液;2)将高密度发酵培养基加入发酵罐中;3)将种子液转接到步骤2)的培养基中进行培养;4)当培养至溶氧下降至50%以下时,加入补料培养基;5)当培养至细菌菌体湿重距最大菌体湿重4g/L时,一次性加入IPTG诱导,使IPTG终浓度为1±0.1mM;6)诱导6~6.5小时后停止发酵,放罐,获取菌体。本发明提高了目标产物的发酵稳定性,并且减少了包涵体的产生,可实现规模化逆转录酶的生产。
-
公开(公告)号:CN115125224A
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN202210959921.5
申请日:2022-08-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种可规模化生产具有活性的DNA聚合酶的方法。所述方法包括以下步骤:1)将携带有目的基因的菌种划线于带氨苄抗性的LB平板上,挑取单菌落培养后作为种子液;2)配置高密度发酵培养基,加入发酵罐中;3)将种子液转接到步骤2)的发酵罐中进行培养;4)当培养至溶氧下降至30%以下时,开始加入补料培养基,控制溶氧为30%以上;5)当培养至细菌菌体湿重距最大菌体湿重4g/L时,一次性加入IPTG诱导,使IPTG终浓度为1±0.1 mM;6)达到最佳诱导时长后停止发酵,放罐,获取菌体。本发明提高了目标产物的发酵稳定性,并且减少了包涵体的产生,可实现规模化生产DNA聚合酶。
-
公开(公告)号:CN114958899A
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202210598320.6
申请日:2022-05-30
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种能在黑曲霉细胞内自主复制的复制子,所述复制子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述复制子是以19种真菌基因组为模板构建宏基因组文库,转化黑曲霉孢子筛选得到,所述复制子来自淡紫色拟青霉基因组。本发明的复制子可以在黑曲霉表达系统中发挥复制功能,并且可以提供比AMA1复制子更高的稳定性,为首次在除构巢曲霉以外的真菌中发现的复制子,丰富了复制子元件库,拓展了丝状真菌利用复制子的选择多样性。
-
公开(公告)号:CN111876523B
公开(公告)日:2021-07-13
申请号:CN202010041731.6
申请日:2020-01-15
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
Abstract: 本发明公开了一种分子检测SARS‑CoV‑2冠状病毒的一步法试剂盒,所述试剂盒包括1)2X RT‑qPCR mix;2)上游引物detF;3)下游引物detR;4)探针probe;5)阳性质控品;6)阴性质控品。本发明设计的引物、探针、搭配市售的一步法RT‑qPCR试剂,做出的SARS‑CoV‑2冠状病毒检测试剂盒,抗人类核酸的干扰能力强。本发明操作简单,耗时短,检测特异性好,灵敏度高,稳定性好,抗来自病毒宿主核酸干扰的能力强,可广泛应用于SARS‑CoV‑2冠状病毒的早期筛查,口岸检验检疫,疫情控制和科学研究等多个领域。
-
公开(公告)号:CN106381312A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610812880.1
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种转化外源长链ssRNA到烟曲霉未萌发孢子中的方法,包括烟曲霉培养和孢子收集、烟曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击烟曲霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在烟曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
-
公开(公告)号:CN106367440A
公开(公告)日:2017-02-01
申请号:CN201610812875.0
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在卷枝毛霉休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括卷枝毛霉培养和孢子收集、卷枝毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击卷枝毛霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在卷枝毛霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
-
公开(公告)号:CN106244620A
公开(公告)日:2016-12-21
申请号:CN201610813630.X
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12R1/685 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了不依赖介质直接转化外源DNA进入黑曲霉休眠孢子的方法,包括黑曲霉培养和孢子收集、黑曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黑曲霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的黑曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入黑曲霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
-
公开(公告)号:CN106148414A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610813618.9
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
IPC: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了利用单链核糖核酸转化尼琦青霉孢子并制造蛋白质的方法,包括尼琦青霉培养和孢子收集、尼琦青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击尼琦青霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在尼琦青霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
-
公开(公告)号:CN106148411A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610812863.8
申请日:2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor: 林峻
IPC: C12N15/87
CPC classification number: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在构巢曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括构巢曲霉培养和孢子收集、构巢曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击构巢曲霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜,在构巢曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速,效果极佳,转化率达到90%以上。
-
-
-
-
-
-
-
-
-