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公开(公告)号:CN115838729A
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210921096.X
申请日:2022-08-02
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/86 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开一种人凝血酶蛋白的核酸适体AS2‑3及其筛选方法和应用,核酸适体AS2‑3的序列如SEQ ID NO:1所示;筛选方法为:在先前筛选得到的人凝血酶蛋白适体的基础上,保留其特定序列进行文库构建,采用Capture‑SELEX方法进行初筛后利用无细胞转录翻译系统的转录过程再次进行筛选,本发明成功得到了既可以与人凝血酶蛋白进行特异性结合,又可以以线性和质粒的形式,在无细胞转录过程中能够响应0.5μM人凝血酶蛋白,而对下游基因转录做出抑制调控的核酸适体序列AS2‑3;通过结合这两种筛选方法,有希望将其应用于其他靶标配体的适体序列筛选,从而有机会代替转录调控因子作为基因元件应用于生物回路中进行调控。
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公开(公告)号:CN115838729B
公开(公告)日:2025-01-17
申请号:CN202210921096.X
申请日:2022-08-02
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/86 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开一种人凝血酶蛋白的核酸适体AS2‑3及其筛选方法和应用,核酸适体AS2‑3的序列如SEQ ID NO:1所示;筛选方法为:在先前筛选得到的人凝血酶蛋白适体的基础上,保留其特定序列进行文库构建,采用Capture‑SELEX方法进行初筛后利用无细胞转录翻译系统的转录过程再次进行筛选,本发明成功得到了既可以与人凝血酶蛋白进行特异性结合,又可以以线性和质粒的形式,在无细胞转录过程中能够响应0.5μM人凝血酶蛋白,而对下游基因转录做出抑制调控的核酸适体序列AS2‑3;通过结合这两种筛选方法,有希望将其应用于其他靶标配体的适体序列筛选,从而有机会代替转录调控因子作为基因元件应用于生物回路中进行调控。
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