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公开(公告)号：CN108250295A
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201810040774.5
申请日：2018-01-16
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开一种利用噬菌体抗体库筛选雌激素受体α单链抗体的方法，包括以下步骤：ERα蛋白作为免疫原免疫新西兰大白兔及脾脏总RNA提取；RT‑PCR扩增VH和VL片段及scFv基因拼接；构建PCANTAB5E‑ScFv重组质粒，重组质粒电转化E.coli TG1感受态细胞构建噬菌体单链抗体库；ERα阳性的乳腺癌组织切片和ERα蛋白作为固相化抗原对抗体库进行亲和富集筛选；采用Phage‑ElLSA法和乳腺癌细胞涂片免疫化学相结合的方法鉴定阳性克隆子。本发明建立了一种利用ERα阳性乳腺癌组织切片对噬菌体抗体库进行雌激素受体特异性筛选的方法，并利用phage‑ElLSA法和乳腺癌细胞涂片免疫化学相结合的方法来鉴定阳性克隆子，为噬菌体抗体库的筛选方法提供了新的思路。
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