公开(公告)号：CN118185999A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202410007063.3

申请日：2024-01-03

Applicant: 福州大学

Inventor： 何小镇 ,  刘钇良 ,  李艳玲 ,  贾志鹏 ,  黄莓 ,  孟瑞 ,  刘念

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/0275 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明属于遗传修饰和动物基因工程的技术领域，具体涉及一种PE‑NRGEER mRNA体外转录模板质粒、PE碱基编辑器及其应用。本发明提供了一种PE‑NRGEER mRNA体外转录模板质粒，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，该体外转录模板质粒经斑马鱼密码子偏好性优化，毒性小；整合了可特异提高RNA模板基因编辑效率的RecO蛋白，效率高，将其与双pegRNA混合制备得到的PE碱基编辑器，大大提高了基因编辑的效率。实验证明，采用本发明提供的技术方案后，显著提升了基因编辑效率达10倍以上，可以高效实现鱼类基因组点突变、短片段核酸序列的敲除和敲入。