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公开(公告)号：CN108998406B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN201810875557.8
申请日：2018-08-03
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种人类原代培养细胞定点基因敲入方法，利用基于切口酶产生DNA单链缺口的技术，辅以一套同源重组修复因子RecOFAR来实现高效、精确、定点的人类原代培养细胞基因组编辑，包括定点基因敲入整合。本发明方法大幅度提高人类原代细胞基因组同源重组整合的效率（可达到20%以上），大大降低成本；本发明方法提高基因组编辑的安全性，有效降低靶位点处（on‑target）随机序列增删（indels)发生的频率，并且有效降低脱靶（off‑target)频率。
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公开(公告)号：CN108949830B
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN201810875554.4
申请日：2018-08-03
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种在鱼类中实现精确定点基因敲入的方法，利用基于切口酶产生DNA单链缺口的技术，辅以一套同源重组修复因子RecOFAR来实现高效、精确、定点的鱼类基因组编辑、基因敲入整合。克服了目前已有方法效率偏低、靶位点随机突变频率较高等等问题。
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公开(公告)号：CN111893168A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010786652.8
申请日：2020-08-07
Applicant: 福州大学 , 西人马大周(萍乡)医疗科技有限公司
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明提供一种用于冻干的QPCR反应缓冲液，包括如下原料：三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液700-800mM、硫酸铵150-250mM、吐温-20 0.05-0.15% V/V、氯化镁30-35mM、海藻糖5-15mg/ml、甲酰胺5-15wt.%。本发明将荧光PCR需要用到的所有组分制备在同一冻干粉末中，能够实现不需要过度依赖低温保存；使用时只需用冻干粉溶解液溶解该冻干粉，然后加入样本即可。具有使用方便、稳定可靠的特点。
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公开(公告)号：CN108998406A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810875557.8
申请日：2018-08-03
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种人类原代培养细胞定点基因敲入方法，利用基于切口酶产生DNA单链缺口的技术，辅以一套同源重组修复因子RecOFAR来实现高效、精确、定点的人类原代培养细胞基因组编辑，包括定点基因敲入整合。本发明方法大幅度提高人类原代细胞基因组同源重组整合的效率（可达到20%以上），大大降低成本；本发明方法提高基因组编辑的安全性，有效降低靶位点处（on-target）随机序列增删（indels)发生的频率，并且有效降低脱靶（off-target)频率。
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公开(公告)号：CN118077648A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202311516280.7
申请日：2023-11-15
Applicant: 福州大学
IPC: A01K67/027 , A61K49/00
Abstract: 本发明提供了一种斑马鱼免疫缺陷模型的构建方法及应用，属于医学和生物实验模型的制备技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：斑马鱼48hpf～120hpf阶段，在培养水体中加入他克莫司和依维莫司进行联合处理；所述他克莫司终浓度为0.5～5ng/mL，所述依维莫司终浓度为5～25μg/mL。本发明造模剂量小且毒副作用小，构建得到的模型实现了对中性粒细胞、胸腺、巨噬细胞和多个免疫相关基因的抑制，对免疫以外的发育等方面并未产生明显的影响，避免了非免疫指标的影响。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117965640A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311807378.8
申请日：2023-12-26
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/89 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/12 , A01K67/0278 , A61P17/00 , A61P17/02
Abstract: 本发明公开了一种COL17A1转基因斑马鱼及其构建与应用。利用CRISPR‑Cas9技术，将人源COL17A1基因序列敲入到斑马鱼染色体上，构建成COL17A1转基因斑马鱼，使其表达人源XVII型胶原蛋白（180kDa）。本发明使用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，首次将人源COL17A1基因序列整合到斑马鱼基因组上，首次用斑马鱼作为载体表达人源XVII型胶原蛋白，以期为生物医学、医疗美容、化妆品、食品等领域提供优质且安全的胶原蛋白材料。
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公开(公告)号：CN117512016A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311807551.4
申请日：2023-12-26
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/89 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/12 , A01K67/0278 , A61P17/00 , A61P17/02
Abstract: 本发明公开了一种构建COL3A1转基因斑马鱼作为载体表达人源Ⅲ型胶原蛋白的方法。该方法主要是利用CRISPR‑Cas9技术，将人源COL3A1基因敲入到斑马鱼的染色体上，构建成COL3A1转基因斑马鱼，使其表达人源Ⅲ型胶原蛋白（161kDa）。本发明使用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，首次将人源COL3A1基因整合到斑马鱼基因组上，首次用斑马鱼作为载体表达人源Ⅲ型胶原蛋白，具有较高的安全性。这为烧伤、创面、创伤、手术、美容等相关皮肤创面修复提供人源Ⅲ型胶原蛋白材料成为可能。
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公开(公告)号：CN115678912B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202110844208.1
申请日：2021-07-26
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N9/22 , C07K14/47 , A01K67/0278 , A61L27/22 , A61L27/54 , A61L27/60
Abstract: 本发明公开了一种构建DGTM转基因斑马鱼作为载体表达人源DGTM蛋白的方法。该方法主要是利用CRISPR‑Cas9技术，将人源的DGTM因子即DNP63A、GRHL2、TFAP2A和MYC基因联合敲入到斑马鱼的染色体上，构建成转基因斑马鱼，使其表达人源的DGTM蛋白。本发明使用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，首次将人源的DGTM因子联合整合到斑马鱼基因组上，首次用斑马鱼作为载体表达人源蛋白，具有较高的安全性。这为烧伤、创面、创伤、手术、美容等相关皮肤创面修复提供人源性DGTM材料成为可能。
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公开(公告)号：CN115678912A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110844208.1
申请日：2021-07-26
Applicant: 福州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N9/22 , C07K14/47 , A01K67/027 , A61L27/22 , A61L27/54 , A61L27/60
Abstract: 本发明公开了一种构建DGTM转基因斑马鱼作为载体表达人源DGTM蛋白的方法。该方法主要是利用CRISPR‑Cas9技术，将人源的DGTM因子即DNP63A、GRHL2、TFAP2A和MYC基因联合敲入到斑马鱼的染色体上，构建成转基因斑马鱼，使其表达人源的DGTM蛋白。本发明使用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，首次将人源的DGTM因子联合整合到斑马鱼基因组上，首次用斑马鱼作为载体表达人源蛋白，具有较高的安全性。这为烧伤、创面、创伤、手术、美容等相关皮肤创面修复提供人源性DGTM材料成为可能。
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公开(公告)号：CN111876473A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010786772.8
申请日：2020-08-07
Applicant: 福州大学 , 西人马大周(萍乡)医疗科技有限公司
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/70
Abstract: 本发明提供一种适用于荧光定量PCR中TTH DNA酶扩增的缓冲液。所述缓冲液包括如下原料：三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液150-250 mM/L、氯化钾90-110mM/L、六水氯化镁30-40 mM/L、硫酸铵80-90 mM/L、二甲基亚砜2-3wt.%、甘油2-3wt.%、吐温-20 0.05-0.2%V/V、聚乙二醇辛基苯基醚0.03-0.05%V/V、牛血清白蛋白0.3-0.4%V/V、甲酰胺0.4-0.6wt.%、甜菜碱450-550mM/L。在特制的buffer中增加了多种TTH DNA酶的保护剂，使得TTH DNA酶可以发挥更强的扩增性和检测灵敏性。
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