公开(公告)号：CN107253988B

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN201710592911.1

申请日：2017-07-19

Applicant: 福州大学

Inventor： 杨娟娟 ,  夏菁潞 ,  孟春 ,  刘照 ,  罗岭 ,  俞博彤

IPC: C07K14/705 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种人源程序性死亡因子配体PD‑L2（hPD‑L2）蛋白的制备方法，属于重组蛋白的制备方法技术领域。本方法采用PCR技术对整个胞外区进行扩增，并与pET‑22b载体进行连接，构建融合表达重组质粒，转入原核表达系统RossetaTM(DE3)宿主菌诱导表达hPD‑L2蛋白，获得上清表达的hPD‑L2蛋白，然后利用Ni‑NTA柱亲和层析纯化，获得高纯度、高稳定性、构象均一的蛋白。本发明制备的hPD‑L2蛋白可作为抗原免疫Balb/c雌性小鼠，用于制备单克隆抗体。通过本发明制备的hPD‑L2蛋白具有流程简便、周期短、成本低、获得的蛋白纯度高与均一性高的特点。

公开(公告)号：CN107253988A

公开(公告)日：2017-10-17

申请号：CN201710592911.1

申请日：2017-07-19

Applicant: 福州大学

Inventor： 杨娟娟 ,  夏菁潞 ,  孟春 ,  刘照 ,  罗岭 ,  俞博彤

IPC: C07K14/705 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种人源程序性死亡因子配体PD‑L2（hPD‑L2）蛋白的制备方法，属于重组蛋白的制备方法技术领域。本方法采用PCR技术对整个胞外区进行扩增，并与pET‑22b载体进行连接，构建融合表达重组质粒，转入原核表达系统RossetaTM(DE3)宿主菌诱导表达hPD‑L2蛋白，获得上清表达的hPD‑L2蛋白，然后利用Ni‑NTA柱亲和层析纯化，获得高纯度、高稳定性、构象均一的蛋白。本发明制备的hPD‑L2蛋白可作为抗原免疫Balb/c雌性小鼠，用于制备单克隆抗体。通过本发明制备的hPD‑L2蛋白具有流程简便、周期短、成本低、获得的蛋白纯度高与均一性高的特点。