公开(公告)号：CN112538521A

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN202011428912.0

申请日：2020-12-09

Applicant: 澳门科技大学

Inventor： 王乾龙 ,  罗培 ,  青琳森 ,  刘兰聪 ,  杨艺 ,  陈肖依 ,  周华

IPC: C12Q1/682 ,  C12Q1/6886 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种检测miRNA的方法，其包括如下步骤：(1)制备PEG修饰的AuNPs，得AuNPs‑PEG；(2)根据待测miRNA的序列合成与之序列完全配对的DNA片段，此DNA片段5’端连接有亲和素，3’端依次连接含有3‑10个碱基序列及linker、‑SH，形成目标miRNA的DNA探针，linker含有至少一个亚甲基；(3)将上述步骤中的DNA探针与AuNPs‑PEG反应，得PEG‑AuNPs‑DNA probe；(4)将含有或不含有目标miRNA的样本、DSN buffer、DSN、RNase抑制剂、PEG‑AuNPs‑DNA probe进行反应；(5)终止反应，向反应系统中加入链霉亲和素包被的磁性颗粒，进行磁分离，收集磁分离后的溶液，定量检测AuNPs的含量。