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公开(公告)号：CN107447031A
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201710838661.5
申请日：2017-09-18
Applicant: 湖南融健基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供了一种乳液中进行环介导等温扩增的突变核酸数字分析方法，将生物素标记的环引物与亲和素标记的磁珠结合后，与环介导等温扩增的内引物、另一荧光标记的内引物、环引物及缓冲溶液、目标核酸、酶等反应试剂混合均匀，与油相在机械作用力下混合均匀，形成稳定的乳液，在适宜的反应温度下，乳液中存在目标突变核酸的液滴发生环介导等温扩增反应，得到磁性颗粒-LAMP产物-荧光标记内引物的复合物，破乳后收集反应得到的磁珠，通过显微镜和流式细胞仪实现突变核酸的数字分析。本发明所述的突变核酸数字分析方法利用环介导等温扩增的优势缩短了时间、提高了效率，实现了突变核酸的定量分析。
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公开(公告)号：CN107447031B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201710838661.5
申请日：2017-09-18
Applicant: 湖南融健基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明提供了一种乳液中进行环介导等温扩增的突变核酸数字分析方法，将生物素标记的环引物与亲和素标记的磁珠结合后，与环介导等温扩增的内引物、另一荧光标记的内引物、环引物及缓冲溶液、目标核酸、酶等反应试剂混合均匀，与油相在机械作用力下混合均匀，形成稳定的乳液，在适宜的反应温度下，乳液中存在目标突变核酸的液滴发生环介导等温扩增反应，得到磁性颗粒‑LAMP产物‑荧光标记内引物的复合物，破乳后收集反应得到的磁珠，通过显微镜和流式细胞仪实现突变核酸的数字分析。本发明所述的突变核酸数字分析方法利用环介导等温扩增的优势缩短了时间、提高了效率，实现了突变核酸的定量分析。
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公开(公告)号：CN107130031A
公开(公告)日：2017-09-05
申请号：CN201710361714.9
申请日：2017-05-22
Applicant: 湖南融健基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/143 , C12Q2563/149 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明提供了一种乳液中进行环介导等温扩增的数字核酸分析方法。本发明的技术方案是以引物标记的磁珠为载体，在稳定的乳液液滴中发生环介导等温扩增反应，磁珠在反应后生成大量的扩增产物并捕捉与之互补的荧光标记引物，破乳后收集反应磁珠，通过显微镜和流式细胞仪对目标DNA/mRNA实现数字核酸分析的目的。本发明所述的数字核酸分析方法的建立为基因诊断和基因治疗等研究提供了一种工艺简单、信号稳定、具有较高的灵敏度与准确性的数字核酸分析手段。
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