公开(公告)号：CN113005209B

公开(公告)日：2022-03-22

申请号：CN202110527388.0

申请日：2021-05-14

Applicant: 湖南科技大学

Inventor： 张翼飞 ,  刘雨芳 ,  许铭元 ,  莫晶 ,  欧雪儿 ,  王浩洋

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于陆生环境DNA检测橘小实蝇的试剂盒及其应用，包括聚碳酸酯蚀滤膜、碱性溶解液、定量PCR反应液、橘小实蝇特异性引物对和Taqman荧光探针。使用时，先清洗待测水果，以滤膜富集洗液中的环境DNA并用碱性溶解液回收；环境DNA经过柱纯化后，作为模板加入定量PCR反应液中，并加入引物对和探针，与不加模板的对照组平行做定量PCR反应；通过比较待测样本与对照组在反应中Cq值的差异，判断样本中橘小实蝇的有无及数量。本发明可在尚未观察到橘小实蝇虫体时即检测出水果中是否存在过该害虫，提升了检测能力和效率。

公开(公告)号：CN113234837A

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202110668348.8

申请日：2021-06-16

Applicant: 湖南科技大学

Inventor： 张翼飞 ,  刘雨芳 ,  王浩洋 ,  欧雪儿 ,  许铭元 ,  陈倩玉

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种通过环境DNA提取及定量PCR来检测样本中是否存在过棉铃虫的试剂盒及其应用方法，包括：聚碳酸酯蚀滤膜、碱性溶解液、定量PCR反应液、棉铃虫特异性引物对和Taqman荧光探针。使用时，先清洗待测果蔬样品，以滤膜富集洗液中的环境DNA并用碱性溶解液回收；环境DNA经过柱纯化后，作为模板加入定量PCR反应液中，并加入引物对和探针，与不加模板的对照组平行做定量PCR反应；通过比较待测样本与对照组在反应中Cq值的差异，判断样本中棉铃虫DNA的有无及相对含量。本发明可在尚未观察到棉铃虫虫体时即检测出果蔬中是否存在过该害虫，提升了检测能力和效率。

公开(公告)号：CN113005209A

公开(公告)日：2021-06-22

申请号：CN202110527388.0

申请日：2021-05-14

Applicant: 湖南科技大学

Inventor： 张翼飞 ,  刘雨芳 ,  许铭元 ,  莫晶 ,  欧雪儿 ,  王浩洋

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于陆生环境DNA检测橘小实蝇的试剂盒及其应用，包括聚碳酸酯蚀滤膜、碱性溶解液、定量PCR反应液、橘小实蝇特异性引物对和Taqman荧光探针。使用时，先清洗待测水果，以滤膜富集洗液中的环境DNA并用碱性溶解液回收；环境DNA经过柱纯化后，作为模板加入定量PCR反应液中，并加入引物对和探针，与不加模板的对照组平行做定量PCR反应；通过比较待测样本与对照组在反应中Cq值的差异，判断样本中橘小实蝇的有无及数量。本发明可在尚未观察到橘小实蝇虫体时即检测出水果中是否存在过该害虫，提升了检测能力和效率。

公开(公告)号：CN116694777A

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN202310692266.6

申请日：2023-06-13

Applicant: 湖南科技大学

Inventor： 张翼飞 ,  宋凯月 ,  王浩洋 ,  孙远东 ,  彭建军 ,  崔小娟 ,  陈芝兰 ,  许铭元 ,  欧雪儿 ,  莫晶

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 一种基于陆生环境DNA检测菜青虫的试剂盒，包括根据目标害虫菜青虫基因组中特异性DNA设计的引物对和Taqman荧光探针；所述菜青虫基因组特异性DNA序列如SEQ ID NO.1所示；所述引物对包括CQC‑F和CQC‑R，所述CQC‑F的DNA序列如SEQ ID NO.2所示，所述CQC‑R的DNA序列如SEQ ID NO.3所示；所述Taqman荧光探针的DNA序列如SEQ ID NO.4所示；所述试剂盒还包括聚碳酸酯蚀滤膜(Φ＝10μm)和缓冲试剂。本发明能快速、准确地检测出某种害虫，对于种的特异性较高，且检测的结果比较精准。另外本发明还能应用于生态学种群分析及入侵害虫的海关检验检疫等多个方面。

公开(公告)号：CN113234837B

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202110668348.8

申请日：2021-06-16

Applicant: 湖南科技大学

Inventor： 张翼飞 ,  刘雨芳 ,  王浩洋 ,  欧雪儿 ,  许铭元 ,  陈倩玉

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种通过环境DNA提取及定量PCR来检测样本中是否存在过棉铃虫的试剂盒及其应用方法，包括：聚碳酸酯蚀滤膜、碱性溶解液、定量PCR反应液、棉铃虫特异性引物对和Taqman荧光探针。使用时，先清洗待测果蔬样品，以滤膜富集洗液中的环境DNA并用碱性溶解液回收；环境DNA经过柱纯化后，作为模板加入定量PCR反应液中，并加入引物对和探针，与不加模板的对照组平行做定量PCR反应；通过比较待测样本与对照组在反应中Cq值的差异，判断样本中棉铃虫DNA的有无及相对含量。本发明可在尚未观察到棉铃虫虫体时即检测出果蔬中是否存在过该害虫，提升了检测能力和效率。