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公开(公告)号：CN116769883A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310855246.6
申请日：2023-07-13
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了基于DNA样品鉴定杂交鱼倍性的方法，其包括如下步骤：(1)引物及特异性探针设计和筛选；(2)基因组DNA提取；(3)qPCR检验探针特异性；(4)ddPCR定量检测：以DNA为模板，利用设计出的引物及物种特异性Taqman探针，双探针法ddPCR扩增，数据采集和分析，通过目标基因的父母本DNA拷贝数的比值推测杂交后代的倍性。本发明首次将物种特异性TaqMan探针和数字定量PCR系统应用到杂交鱼类的倍性鉴定中，从而实现不依赖于活体材料的杂交鱼倍性鉴定，提高鱼类远缘杂交育种研究中实验材料的保护和利用率。而且操作简便易实现，适合快速大量的实验样本倍性的鉴定操作。
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公开(公告)号：CN115807037B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202211177268.3
申请日：2022-09-26
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12Q1/686 , A01K67/0276 , G01N15/14
Abstract: 本发明公开了一种遗传可控的四倍体鱼的选育方法及三倍体鱼的制备方法：利用基因敲除技术对目标鱼cntd1基因进行敲除，通过基因型鉴定和选育获得cntd1纯合敲除个体；利用cntd1纯合敲除二倍体雌鱼能够产生部分不减数卵子的特性，可获得三倍体鱼，进而筛选获得cntd1纯合敲除三倍体(3N_cntd‑/‑/‑)鱼；利用3N_cntd‑/‑/‑雌鱼能够产生部分不减数卵子的特性，可获得四倍体鱼，进而筛选获得杂合突变四倍体(4N_cntd‑/‑/‑/+)鱼；利用4N_cntd‑/‑/‑/+能够产生大量二倍体配子的特性，进而制备大量的三倍体鱼。与其他多倍体育种方法相比，本发明的方法，具有普适性和遗传可控性。
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公开(公告)号：CN117867016A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202311633154.X
申请日：2023-11-30
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/0276 , C12N15/12 , C12N15/11 , C12Q1/6888 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于鱼类育种领域，公开了一种通过敲除mstnb基因获得快速生长红鲫纯合品系的方法，包括如下步骤：制备红鲫mstnb基因的gRNA，将gRNA与Cas9mRNA的混合物显微注射到红鲫的一细胞期受精卵中，筛选获得F0代突变体；将F0代突变体与野生型红鲫交配，筛选获得F1代突变体；F1代突变体自交获得F2代突变体，筛选得到纯合突变体；纯合突变体自交扩繁，即得。本发明首次在红鲫中通过CRISPR/Cas9基因编辑技术成功建立了mstnb纯合敲除品系，获得的mstnb突变红鲫在12月龄较野生型体重提高29.57％、肌肉蛋白含量提高9.80％，为鱼类遗传育种提供优质种质资源，具有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118947633A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411261712.9
申请日：2024-09-10
Applicant: 湖南师范大学
IPC: A01K67/027 , A01K61/10
Abstract: 本发明公开一种高效诱导异源多倍体鱼苗的方法，属于鱼类育种技术领域。本发明方法包括以下技术步骤：(1)远缘杂交亲本催产：在鲤科鱼类不同亚科中挑选母本亲鱼和父本亲鱼，分别采集成熟卵子和精液；(2)获取杂交受精卵：将采集到的卵子与精液进行混合，干法人工授精，获得杂交受精卵；(3)诱导异源多倍体：将受精卵于置入水浴中进行热休克处理，以抑制第二极体排出或抑制第一次卵裂，然后将处理后的受精卵迅速转移至养殖用水中，继续孵化出鱼苗。本发明方法将亚科间远缘杂交方法与热休克诱导方法相结合，利用该方法进行诱导后，孵化鱼苗的倍化率可达100％，显著提高了远缘杂交的异源多倍体鱼苗产率。
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公开(公告)号：CN116769883B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202310855246.6
申请日：2023-07-13
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了基于DNA样品鉴定杂交鱼倍性的方法，其包括如下步骤：(1)引物及特异性探针设计和筛选；(2)基因组DNA提取；(3)qPCR检验探针特异性；(4)ddPCR定量检测：以DNA为模板，利用设计出的引物及物种特异性Taqman探针，双探针法ddPCR扩增，数据采集和分析，通过目标基因的父母本DNA拷贝数的比值推测杂交后代的倍性。本发明首次将物种特异性TaqMan探针和数字定量PCR系统应用到杂交鱼类的倍性鉴定中，从而实现不依赖于活体材料的杂交鱼倍性鉴定，提高鱼类远缘杂交育种研究中实验材料的保护和利用率。而且操作简便易实现，适合快速大量的实验样本倍性的鉴定操作。
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公开(公告)号：CN112430628B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN202011205563.6
申请日：2020-11-02
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 本申请实施例提供一种脊柱侧弯动物模型的建立方法，包括以下步骤：基于靶点基因，合成gRNA和Cas9 mRNA，靶点基因与ccdc57基因的外显子对应。将gRNA和Cas9 mRNA载入至斑马鱼的胚胎中，获得F0胚胎；F0胚胎培育至性成熟后与野生型斑马鱼交配获得F1胚胎，筛选有效突变胚胎培育至成年后获得相同基因型的有效敲除斑马鱼，将有效敲除斑马鱼进行自交获得F2胚胎，培育至成年筛选获得ccdc57纯合敲除斑马鱼。由于鱼类脊椎受到的流水阻力与人类直立行走脊椎所受重力相似，因此，斑马鱼建立的脊柱侧弯动物模型更适合对脊椎侧弯致病机理的挖掘和治疗方案的探究。
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公开(公告)号：CN115807037A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202211177268.3
申请日：2022-09-26
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/89 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12Q1/686 , A01K67/027 , G01N15/14
Abstract: 本发明公开了一种遗传可控的四倍体鱼的选育方法及三倍体鱼的制备方法：利用基因敲除技术对目标鱼cntd1基因进行敲除，通过基因型鉴定和选育获得cntd1纯合敲除个体；利用cntd1纯合敲除二倍体雌鱼能够产生部分不减数卵子的特性，可获得三倍体鱼，进而筛选获得cntd1纯合敲除三倍体(3N_cntd‑/‑/‑)鱼；利用3N_cntd‑/‑/‑雌鱼能够产生部分不减数卵子的特性，可获得四倍体鱼，进而筛选获得杂合突变四倍体(4N_cntd‑/‑/‑/+)鱼；利用4N_cntd‑/‑/‑/+能够产生大量二倍体配子的特性，进而制备大量的三倍体鱼。与其他多倍体育种方法相比，本发明的方法，具有普适性和遗传可控性。
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公开(公告)号：CN112430628A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011205563.6
申请日：2020-11-02
Applicant: 湖南师范大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 本申请实施例提供一种脊柱侧弯动物模型的建立方法，包括以下步骤：基于靶点基因，合成gRNA和Cas9 mRNA，靶点基因与ccdc57基因的外显子对应。将gRNA和Cas9 mRNA载入至斑马鱼的胚胎中，获得F0胚胎；F0胚胎培育至性成熟后与野生型斑马鱼交配获得F1胚胎，筛选有效突变胚胎培育至成年后获得相同基因型的有效敲除斑马鱼，将有效敲除斑马鱼进行自交获得F2胚胎，培育至成年筛选获得ccdc57纯合敲除斑马鱼。由于鱼类脊椎受到的流水阻力与人类直立行走脊椎所受重力相似，因此，斑马鱼建立的脊柱侧弯动物模型更适合对脊椎侧弯致病机理的挖掘和治疗方案的探究。
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