公开(公告)号：CN118947633A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411261712.9

申请日：2024-09-10

Applicant: 湖南师范大学

Inventor： 刘少军 ,  杨聪慧 ,  刘琼 ,  朱雅婷 ,  钟欢 ,  周毅 ,  舒玉琴

IPC: A01K67/027 ,  A01K61/10

Abstract: 本发明公开一种高效诱导异源多倍体鱼苗的方法，属于鱼类育种技术领域。本发明方法包括以下技术步骤：(1)远缘杂交亲本催产：在鲤科鱼类不同亚科中挑选母本亲鱼和父本亲鱼，分别采集成熟卵子和精液；(2)获取杂交受精卵：将采集到的卵子与精液进行混合，干法人工授精，获得杂交受精卵；(3)诱导异源多倍体：将受精卵于置入水浴中进行热休克处理，以抑制第二极体排出或抑制第一次卵裂，然后将处理后的受精卵迅速转移至养殖用水中，继续孵化出鱼苗。本发明方法将亚科间远缘杂交方法与热休克诱导方法相结合，利用该方法进行诱导后，孵化鱼苗的倍化率可达100％，显著提高了远缘杂交的异源多倍体鱼苗产率。

公开(公告)号：CN118389648A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410540526.2

申请日：2024-04-30

Applicant: 湖南师范大学

Inventor： 邹振 ,  刘琼 ,  杨荣华 ,  李银锋 ,  马士蒙 ,  陈湘

IPC: C12Q1/6827

Abstract: 本发明公开了一种基于crRNA间隔区裂分进行单核苷酸多态性识别的方法及应用，通过将与靶标碱基互补配对的crRNA间隔区分裂获得识别探针，当识别探针与目标序列完全互补配对时，激活Cas12a蛋白，产生显著荧光信号；当目标序列中存在与分裂式间隔区错配的碱基时，分裂的crRNA间隔区难以与不完全匹配序列组装，Cas12系统不被激活，不产生荧光信号。本发明的方法增强CRISPR/Cas12a对单碱基错配的高特异性识别能力，使得SNP的检测不受错配碱基位置的限制，并在低突变丰度中仍展示高分辨度，用于制备单核苷酸错配的检测试剂盒，以满足针对临床样品的实际检测要求。

公开(公告)号：CN116769883B

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202310855246.6

申请日：2023-07-13

Applicant: 湖南师范大学

Inventor： 杨聪慧 ,  刘少军 ,  戴承华 ,  刘琼 ,  舒玉琴 ,  周毅 ,  张纯 ,  许效玮

IPC: C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了基于DNA样品鉴定杂交鱼倍性的方法，其包括如下步骤：(1)引物及特异性探针设计和筛选；(2)基因组DNA提取；(3)qPCR检验探针特异性；(4)ddPCR定量检测：以DNA为模板，利用设计出的引物及物种特异性Taqman探针，双探针法ddPCR扩增，数据采集和分析，通过目标基因的父母本DNA拷贝数的比值推测杂交后代的倍性。本发明首次将物种特异性TaqMan探针和数字定量PCR系统应用到杂交鱼类的倍性鉴定中，从而实现不依赖于活体材料的杂交鱼倍性鉴定，提高鱼类远缘杂交育种研究中实验材料的保护和利用率。而且操作简便易实现，适合快速大量的实验样本倍性的鉴定操作。

公开(公告)号：CN116769883A

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202310855246.6

申请日：2023-07-13

Applicant: 湖南师范大学

Inventor： 杨聪慧 ,  刘少军 ,  戴承华 ,  刘琼 ,  舒玉琴 ,  周毅 ,  张纯 ,  许效玮

IPC: C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了基于DNA样品鉴定杂交鱼倍性的方法，其包括如下步骤：(1)引物及特异性探针设计和筛选；(2)基因组DNA提取；(3)qPCR检验探针特异性；(4)ddPCR定量检测：以DNA为模板，利用设计出的引物及物种特异性Taqman探针，双探针法ddPCR扩增，数据采集和分析，通过目标基因的父母本DNA拷贝数的比值推测杂交后代的倍性。本发明首次将物种特异性TaqMan探针和数字定量PCR系统应用到杂交鱼类的倍性鉴定中，从而实现不依赖于活体材料的杂交鱼倍性鉴定，提高鱼类远缘杂交育种研究中实验材料的保护和利用率。而且操作简便易实现，适合快速大量的实验样本倍性的鉴定操作。