公开(公告)号：CN101665838A

公开(公告)日：2010-03-10

申请号：CN200910308402.7

申请日：2009-10-16

Applicant: 湖南大学

Inventor： 阮敏 ,  牛承岗 ,  王晓钰 ,  秦品珠 ,  曾光明 ,  何慧 ,  黄兢

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于时间分辨荧光法和DNA杂交的大肠埃希氏菌检测方法。根据大肠埃希氏菌DNA目标序列设计了捕获探针DNA 1 和识别探针DNA 2 ，捕获探针DNA 1 固定标记在玻璃片上；识别探针DNA 2 联接长寿命发光稀土铕配合物。当DNA 1 与DNA 2 串联时能够与目标DNA(即待测生物的DNA)发生碱基互补的杂交反应；构建了基于普通玻片表面两探针串联的DNA检测模型。将长寿命发光的稀土铕配合物作为识别探针DNA 2 的标记物，利用时间分辨荧光的方法能有效消除生物体系内源荧光和固体基质背景光的干扰。本发明检测方法用时短，反应结果直观、灵敏、准确，具有十分显著的优点。

公开(公告)号：CN101845486A

公开(公告)日：2010-09-29

申请号：CN200910227169.X

申请日：2009-12-10

Applicant: 湖南大学

Inventor： 阮敏 ,  牛承岗 ,  秦品珠 ,  王晓钰 ,  曾光明 ,  何慧 ,  黄兢

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/06 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基于时间分辨荧光法和DNA杂交的金黄色葡萄球菌的检测方法。根据金黄色葡萄球菌DNA目标序列设计了捕获探针DNA1和识别探针DNA2，并构建了基于普通玻片表面两探针串联的DNA检测模型。将长寿命发光的稀土铕配合物作为识别探针DNA2的标记物，利用时间分辨荧光的方法能有效消除生物体系内源荧光和固体基质背景光的干扰。本发明通过严格控制杂交实验因素与洗涤条件等措施，经过大量、反复的实验研究，得到了该杂交体系的最佳检测条件，并获得了满意的特异性和灵敏度，为金黄色葡萄球菌的检验方法提供了科学系统的参考条件。本发明用时短，反应结果直观、灵敏、准确，具有十分显著的优点。