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公开(公告)号:CN102715085B
公开(公告)日:2014-04-16
申请号:CN201210201775.6
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种诱导红豆杉种子种胚获得愈伤组织和悬浮细胞的方法。包括:(1)种子外种皮剥离;(2)外植体消毒;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)分离合子胚;(5)愈伤组织的诱导;(6)愈伤组织的继代培养;(7)愈伤组织的悬浮培养:挑取生长势好的淡黄色合子胚细胞系,转入液体培养基中进行悬浮培养,获得红豆杉合子胚愈伤组织悬浮细胞。本发明具有简便、快速获取红豆杉愈伤组织以及利用该愈伤组织给红豆杉的细胞悬浮培养提供原料或者进一步筛选高产紫杉醇细胞株提供优质筛选材料的特点,能节省大量的人力、物力、提高劳动效率。
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公开(公告)号:CN102687667B
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201210203083.5
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种红豆杉成熟胚乳诱导单倍体胚乳愈伤组织的方法。包括:(1)种子外种皮剥离:利用机械破壳,手工剥离外种皮;(2)外植体消毒:依次经70%酒精消毒90s和0.1%氯化汞消毒12min,无菌水冲洗5次后备用;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)胚乳组织的分离;(5)胚乳愈伤组织的离体诱导:将种子胚乳接种到愈伤组织诱导培养基上,30天后可以获得97.92%的诱导率。本发明能简便、快速获得红豆杉成熟胚乳愈伤组织,为简化遗传分析、染色体操作、作为转基因材料以及基因组学研究材料打下基础。
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公开(公告)号:CN102715086A
公开(公告)日:2012-10-10
申请号:CN201210201777.5
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种红豆杉试管苗诱导获得愈伤组织和悬浮细胞的方法。包括:(1)种子外种皮剥离:利用机械破壳,手工剥离外种皮;(2)外植体消毒:依次经70%酒精消毒90s和0.1%氯化汞消毒12min,无菌水冲洗5次后备用;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)分离合子胚;(5)试管苗的诱导:将种胚接种到试管苗诱导培养基上;(6)愈伤组织的诱导;(7)愈伤组织的继代培养;(8)愈伤组织的悬浮培养。本发明具有简便、快速获取红豆杉愈伤组织以及利用该愈伤组织给红豆杉的细胞悬浮培养提供原料或者进一步筛选高产紫杉醇细胞株提供优质筛选材料的特点,能节省大量的人力、物力、提高劳动效率。
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公开(公告)号:CN102687667A
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201210203083.5
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种红豆杉成熟胚乳诱导单倍体胚乳愈伤组织的方法。包括:(1)种子外种皮剥离:利用机械破壳,手工剥离外种皮;(2)外植体消毒:依次经70%酒精消毒90s和0.1%氯化汞消毒12min,无菌水冲洗5次后备用;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)胚乳组织的分离;(5)胚乳愈伤组织的离体诱导:将种子胚乳接种到愈伤组织诱导培养基上,30天后可以获得97.92%的诱导率。本发明能简便、快速获得红豆杉成熟胚乳愈伤组织,为简化遗传分析、染色体操作、作为转基因材料以及基因组学研究材料打下基础。
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公开(公告)号:CN102715086B
公开(公告)日:2014-04-16
申请号:CN201210201777.5
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种红豆杉试管苗诱导获得愈伤组织和悬浮细胞的方法。包括:(1)种子外种皮剥离:利用机械破壳,手工剥离外种皮;(2)外植体消毒:依次经70%酒精消毒90s和0.1%氯化汞消毒12min,无菌水冲洗5次后备用;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)分离合子胚;(5)试管苗的诱导:将种胚接种到试管苗诱导培养基上;(6)愈伤组织的诱导;(7)愈伤组织的继代培养;(8)愈伤组织的悬浮培养。本发明具有简便、快速获取红豆杉愈伤组织以及利用该愈伤组织给红豆杉的细胞悬浮培养提供原料或者进一步筛选高产紫杉醇细胞株提供优质筛选材料的特点,能节省大量的人力、物力、提高劳动效率。
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公开(公告)号:CN102726292B
公开(公告)日:2014-02-05
申请号:CN201210201360.9
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速打破南方红豆杉种子休眠的方法。包括:(1)种子外种皮剥离:利用机械破壳,手工剥离外种皮;(2)外植体消毒:依次经70%酒精消毒90s和0.1%氯化汞消毒12min,无菌水冲洗5次后备用;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)分离合子胚;(5)试管苗的离体培养:将种胚接种到试管苗诱导培养基上,可以获得99.9%的种子萌发率。本发明提供了一种简便、快速打破南方红豆杉种子休眠的方法,为获取整齐一致的南方红豆杉种苗打下基础,能节省大量的人力、物力、提高劳动效率。
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公开(公告)号:CN102726292A
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201210201360.9
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种快速打破南方红豆杉种子休眠的方法。包括:(1)种子外种皮剥离:利用机械破壳,手工剥离外种皮;(2)外植体消毒:依次经70%酒精消毒90s和0.1%氯化汞消毒12min,无菌水冲洗5次后备用;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)分离合子胚;(5)试管苗的离体培养:将种胚接种到试管苗诱导培养基上,可以获得99.9%的种子萌发率。本发明提供了一种简便、快速打破南方红豆杉种子休眠的方法,为获取整齐一致的南方红豆杉种苗打下基础,能节省大量的人力、物力、提高劳动效率。
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公开(公告)号:CN102715085A
公开(公告)日:2012-10-10
申请号:CN201210201775.6
申请日:2012-06-19
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种诱导红豆杉种子种胚获得愈伤组织和悬浮细胞的方法。包括:(1)种子外种皮剥离;(2)外植体消毒;(3)种子预处理:用无菌水密封常温浸种1-5天;(4)分离合子胚;(5)愈伤组织的诱导;(6)愈伤组织的继代培养;(7)愈伤组织的悬浮培养:挑取生长势好的淡黄色合子胚细胞系,转入液体培养基中进行悬浮培养,获得红豆杉合子胚愈伤组织悬浮细胞。本发明具有简便、快速获取红豆杉愈伤组织以及利用该愈伤组织给红豆杉的细胞悬浮培养提供原料或者进一步筛选高产紫杉醇细胞株提供优质筛选材料的特点,能节省大量的人力、物力、提高劳动效率。
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