公开(公告)号：CN113388655A

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202110626553.8

申请日：2021-06-04

Applicant: 清华大学

Inventor： 卢元 ,  林晓媚 ,  王婷

IPC: C12P21/00 ,  C07K14/165 ,  C07K14/435 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125 ,  C12R1/07 ,  C12R1/63

Abstract: 本申请提供了一种基于细菌底盘的无细胞蛋白质合成系统，所述细菌底盘为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、谷氨酸芽孢杆菌或需钠弧菌细胞提取物；本申请还提供了各种底盘适合的密码子优化、感受态细胞、质粒浓度、RBS序列、无细胞体系试剂组分浓度等。本申请的体系都具有产生治疗性蛋白，例如SARS‑CoV‑2受体结合域蛋白的潜力。不同细菌底盘的无细胞蛋白质合成体系不仅可以扩大体外蛋白质生产的潜在选择，还可以通过扩大无细胞蛋白质合成平台来扩展体系的应用范围。

公开(公告)号：CN110283716B

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN201910537646.6

申请日：2019-06-20

Applicant: 清华大学

Inventor： 张吉松 ,  周才金 ,  卢元 ,  林晓媚

IPC: C12M1/40 ,  C12M1/38 ,  C12M1/24 ,  C12M1/04 ,  C12M1/02 ,  C12M1/00 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明涉及一种用于无细胞蛋白质连续合成的装置及相应的合成方法，该装置包括：液体提供单元、气体提供单元、微型套管膜反应单元、控温单元、和蛋白质纯化单元。液体提供单元、气体提供单元、蛋白质纯化单元分别与微型套管膜反应单元连接，控温单元控制微型套管膜反应单元的反应温度，蛋白质纯化单元纯化微型套管膜反应单元排出的反应产物。本连续合成装置及使用其的方法具有蛋白质合成效率高、表达量灵活可控、氧气浓度可控、气体传质速度快、易与后续蛋白质纯化集成等优点，同时，该方法具有很好的普适性和生物相容性，可用于抗体、疫苗、多肽、酶等多种蛋白质合成。

公开(公告)号：CN113388655B

公开(公告)日：2022-07-19

申请号：CN202110626553.8

申请日：2021-06-04

Applicant: 清华大学

Inventor： 卢元 ,  林晓媚 ,  王婷

IPC: C12P21/00 ,  C07K14/165 ,  C07K14/435 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125 ,  C12R1/07 ,  C12R1/63

Abstract: 本申请提供了一种基于细菌底盘的无细胞蛋白质合成系统，所述细菌底盘为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、谷氨酸芽孢杆菌或需钠弧菌细胞提取物；本申请还提供了各种底盘适合的密码子优化、感受态细胞、质粒浓度、RBS序列、无细胞体系试剂组分浓度等。本申请的体系都具有产生治疗性蛋白，例如SARS‑CoV‑2受体结合域蛋白的潜力。不同细菌底盘的无细胞蛋白质合成体系不仅可以扩大体外蛋白质生产的潜在选择，还可以通过扩大无细胞蛋白质合成平台来扩展体系的应用范围。

公开(公告)号：CN118165851A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202211571059.7

申请日：2022-12-08

Applicant: 清华大学

Inventor： 卢元 ,  林晓媚

IPC: C12N1/20 ,  C07K14/165 ,  C12N15/70 ,  C12N15/65 ,  G01N33/543 ,  G01N33/68 ,  C12R1/19

Abstract: 本申请公开了一种用于无细胞反应体系的添加剂、组合物及其应用，所述添加剂为天然囊泡，本申请使用所述的添加剂进行无细胞反应，所得到的嗅觉受体蛋白都有较好的表达，并且也具有较好的可溶性，这可以为后续传感器的开发提供了多种不同的传感元件，并且本申请使用所述的添加剂进行无细胞反应，所得到的新冠病毒受体蛋白均具有较好的表达，也具有较好的可溶性，并且所述的新冠病毒受体蛋白可以被用于物种全长ACE2的表达及结合力表征等工作。

公开(公告)号：CN113046380A

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN202110297055.3

申请日：2021-03-19

Applicant: 清华大学

Inventor： 卢元 ,  林晓媚

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/435

Abstract: 本申请提供了一种基于细胞内源σ因子的，用于大肠杆菌无细胞蛋白质合成的方法，其特征在于：所述方法利用大肠杆菌或枯草芽孢杆菌内源的σ因子以及对应的启动子组成的蛋白表达基因元件在无细胞蛋白合成体系中进行蛋白质表达。

公开(公告)号：CN110283716A

公开(公告)日：2019-09-27

申请号：CN201910537646.6

申请日：2019-06-20

Applicant: 清华大学

Inventor： 张吉松 ,  周才金 ,  卢元 ,  林晓媚

IPC: C12M1/40 ,  C12M1/38 ,  C12M1/24 ,  C12M1/04 ,  C12M1/02 ,  C12M1/00 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明涉及一种用于无细胞蛋白质连续合成的装置及相应的合成方法，该装置包括：液体提供单元、气体提供单元、微型套管膜反应单元、控温单元、和蛋白质纯化单元。液体提供单元、气体提供单元、蛋白质纯化单元分别与微型套管膜反应单元连接，控温单元控制微型套管膜反应单元的反应温度，蛋白质纯化单元纯化微型套管膜反应单元排出的反应产物。本连续合成装置及使用其的方法具有蛋白质合成效率高、表达量灵活可控、氧气浓度可控、气体传质速度快、易与后续蛋白质纯化集成等优点，同时，该方法具有很好的普适性和生物相容性，可用于抗体、疫苗、多肽、酶等多种蛋白质合成。