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公开(公告)号:CN1880460A
公开(公告)日:2006-12-20
申请号:CN200610078951.6
申请日:2006-04-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌自裂解方法及其专用载体与应用。该载体是自5’至3’端顺次连接有热启动子,噬菌体裂解基因和大肠杆菌终止子的大肠杆菌表达载体。该大肠杆菌自裂解方法是将所述大肠杆菌自裂解载体导入大肠杆菌中,得到重组大肠杆菌,再将重组大肠杆菌热诱导后,大肠杆菌细胞裂解。实验证明该载体经适宜的温度诱导使Lambda噬菌体的裂解基因SRRz获得表达,从而使宿主细胞裂解,释放具有生物活性的外源目标蛋白到达培养基,以利于定向进化中后续的高通量筛选的进行,具有廉价、快捷的优点。
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公开(公告)号:CN100448999C
公开(公告)日:2009-01-07
申请号:CN200610078952.0
申请日:2006-04-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌自裂解方法及其专用载体与应用。该载体是自5’至3’端顺次连接有紫外启动子,噬菌体裂解基因和大肠杆菌终止子的大肠杆菌表达载体。该大肠杆菌自裂解方法是将所述大肠杆菌自裂解载体导入大肠杆菌中,得到重组大肠杆菌,将重组大肠杆菌在紫外线下照射,大肠杆菌细胞裂解。实验证明该载体可在紫外诱导下使Lambda噬菌体的裂解基因SRRz获得表达,从而使宿主细胞裂解,释放具有生物活性的外源目标蛋白到达培养基,以利于定向进化中后续的高通量筛选的进行;此外,在紫外诱导条件下即可用本发明的载体进行胞内酶的高通量筛选,具有廉价、快捷的优点。
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公开(公告)号:CN100439506C
公开(公告)日:2008-12-03
申请号:CN200610078951.6
申请日:2006-04-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌自裂解方法及其专用载体与应用。该载体是自5’至3’端顺次连接有热启动子,噬菌体裂解基因和大肠杆菌终止子的大肠杆菌表达载体。该大肠杆菌自裂解方法是将所述大肠杆菌自裂解载体导入大肠杆菌中,得到重组大肠杆菌,再将重组大肠杆菌热诱导后,大肠杆菌细胞裂解。实验证明该载体经适宜的温度诱导使Lambda噬菌体的裂解基因SRRz获得表达,从而使宿主细胞裂解,释放具有生物活性的外源目标蛋白到达培养基,以利于定向进化中后续的高通量筛选的进行,具有廉价、快捷的优点。
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公开(公告)号:CN1880461A
公开(公告)日:2006-12-20
申请号:CN200610078952.0
申请日:2006-04-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌自裂解方法及其专用载体与应用。该载体是自5’至3’端顺次连接有紫外启动子,噬菌体裂解基因和大肠杆菌终止子的大肠杆菌表达载体。该大肠杆菌自裂解方法是将所述大肠杆菌自裂解载体导入大肠杆菌中,得到重组大肠杆菌,将重组大肠杆菌在紫外线下照射,大肠杆菌细胞裂解。实验证明该载体可在紫外诱导下使Lambda噬菌体的裂解基因SRRz获得表达,从而使宿主细胞裂解,释放具有生物活性的外源目标蛋白到达培养基,以利于定向进化中后续的高通量筛选的进行;此外,在紫外诱导条件下即可用本发明的载体进行胞内酶的高通量筛选,具有廉价、快捷的优点。
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