公开(公告)号：CN102321146A

公开(公告)日：2012-01-18

申请号：CN201110206801.X

申请日：2011-07-22

Applicant: 清华大学

Inventor： 张林琦 ,  史宣玲 ,  左腾 ,  汪桦 ,  姚辰

IPC: C07K1/00 ,  C12N15/11 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明公开了一种利用酵母表面展示系统分析单抗表位的方法及其在疫苗开发中的应用。本发明提供的方法，包括如下步骤：(1)构建目的蛋白的DNA文库；(2)将DNA文库展示在酵母表面，得到酵母展示文库；(3)将目的蛋白的单抗与酵母展示文库甲混合，分选出与单抗结合的酵母；(4)将筛选出的酵母提取质粒进行测序，分析所述目的蛋白的抗原表位。同传统方法相比，本发明的优点：(1)酵母细胞对蛋白的修饰途径更多，可以展示大分子量和复杂蛋白；(2)酵母可采用FACS逐个筛选，提高准确性与筛选通量；(3)酵母可独立完成自身的生长复制过程，操作简便，干扰因素少；(4)酵母本身即为免疫佐剂，可检验抗原表位能否再诱导类似活性的抗体产生。