公开(公告)号：CN115786248A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211462653.2

申请日：2022-11-21

Applicant: 清华大学

Inventor： 王霞 ,  金华 ,  关家伟 ,  赵茜 ,  赵媛媛 ,  周福来 ,  赵宇煊

IPC: C12N5/074 ,  C12N5/095 ,  C12N5/071 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明属于细胞培养领域，具体公开了一种滋养层细胞共培养体系培养干细胞/类器官的方法及应用，所述方法包括：利用纯化好的逆转录病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞，形成稳定表达R‑spodin1和Noggin基因的胚胎成纤维细胞系；将胚胎成纤维细胞系进行辐照筛选出单克隆细胞系，并以单克隆细胞系为滋养层细胞与多种表达因子组合共同作为共培养体系培养干细胞或类器官。在此培养体系下，干细胞能够长期稳定的传代，干细胞的克隆形成、增殖与分化潜能没有受到影响，3D气液界面类器官培养在结构和功能上也没有受到影响。同时获得的滋养层细胞，可以节约R‑spodin1和Noggin的购买成本，削弱了实验经费对科学研究的制约。

公开(公告)号：CN115786248B

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202211462653.2

申请日：2022-11-21

Applicant: 清华大学

Inventor： 王霞 ,  金华 ,  关家伟 ,  赵茜 ,  赵媛媛 ,  周福来 ,  赵宇煊

IPC: C12N5/074 ,  C12N5/095 ,  C12N5/071 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明属于细胞培养领域，具体公开了一种滋养层细胞共培养体系培养干细胞/类器官的方法及应用，所述方法包括：利用纯化好的逆转录病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞，形成稳定表达R‑spodin1和Noggin基因的胚胎成纤维细胞系；将胚胎成纤维细胞系进行辐照筛选出单克隆细胞系，并以单克隆细胞系为滋养层细胞与多种表达因子组合共同作为共培养体系培养干细胞或类器官。在此培养体系下，干细胞能够长期稳定的传代，干细胞的克隆形成、增殖与分化潜能没有受到影响，3D气液界面类器官培养在结构和功能上也没有受到影响。同时获得的滋养层细胞，可以节约R‑spodin1和Noggin的购买成本，削弱了实验经费对科学研究的制约。

公开(公告)号：CN115109752A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202210853398.8

申请日：2022-07-08

Applicant: 清华大学

Inventor： 王霞 ,  张晶 ,  周福来

IPC: C12N5/0797 ,  A01N1/02

Abstract: 本发明涉及一种神经干细胞培养基、冻存液以及神经干细胞的制备方法。所述神经干细胞培养基包含基础培养基以及FBS、L‑谷氨酰胺、D‑葡萄糖、ng/mL表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、转铁蛋白、孕酮、腐氨、亚硒酸钠、胰岛素、肝素、Human Noggin、SB4315422和烟酰胺；所述基础培养基包含DMEM培养基和F12培养基。采用该特定配方的神经干细胞培养基对神经干细胞进行培养，能够实现神经干细胞的高效扩增，且扩增所得神经干细胞保持良好的干性，克服传统神经干细胞存在短期扩增量低、容易分化导致干性丧失的缺陷。