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公开(公告)号：CN106498044A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201610906439.X
申请日：2016-10-18
Applicant: 淮海工学院
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量检测方法，包括如下步骤：分别选择腺苷酸转移酶基因(ANT)和ATP6基因作为脊尾白虾细胞核基因组和线粒体基因组的单拷贝基因，设计适于ANT和ATP6基因实时定量PCR反应的引物和Taqman荧光探针；制备ANT和ATP6基因实时定量PCR反应的标准品，通过绘制标准曲线(如摘要附图所示)，以标准曲线为标准，对待测样本细胞中的线粒体基因组的拷贝数进行定量和测算。本发明可以准确的定量检测脊尾白虾组织样本细胞中线粒体基因组的拷贝数，具有特异性高、操作简单的优点，只需普通荧光定量PCR仪就可以完成脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量。
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公开(公告)号：CN104604757B
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201410245722.3
申请日：2014-06-06
Applicant: 淮海工学院
IPC: A01K61/59
CPC classification number: Y02A40/81 , Y02A40/824
Abstract: 本发明是一种三疣梭子蟹苗种质量检测技术，是以不同重金属离子组成的逆性环境体系来检测苗种质量的检测方法，属于水产养殖学领域，其特征在于利用正交试验设计获得一个适合于区分不同苗种质量的逆性环境体系及应用此体系可以区分出不同苗种质量差异的检测时间范围。其技术方案要点是，首先利用正交试验设计获得一个区分三疣梭子蟹幼蟹活力的逆性环境体系：Fe2+为4.47mg/L、Mn2+为56.23mg/L、Hg2+为0.5mg/L、Cu2+为5.01mg/L和Zn2+为10mg/L；其次，利用该体系获得一个评价苗种质量的指标，即致死时间0‑2.5小时的苗种质量较差；致死时间2.6‑3.5小时的苗种质量中等；致死时间3.5小时以上的为优质苗种。此发明可以为三疣梭子蟹池塘养殖放苗前的苗种质量评价提供定量依据。
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公开(公告)号：CN104611417A
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201410820918.0
申请日：2014-12-25
Applicant: 淮海工学院
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q1/6827 , C12Q2600/156 , C12Q2525/151
Abstract: 本发明是一种三疣梭子蟹微卫星种质鉴别技术，其特征是首先提取三疣梭子蟹基因组DNA，然后建立三疣梭子蟹富含微卫星的基因组文库，再对文库进行测序获得富含微卫星的序列；挑选出基因组文库中的一个编号为SZX-18的序列，并在其序列两端设计适合PCR扩增的特异性引物，并对三疣梭子蟹基因组DNA进行PCR扩增，将获得的PCR产物在变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，利用产物出现的条带进行分析，确定每个个体的基因型。本发明适用于三疣梭子蟹种质资源的追踪和家系识别分析等研究。
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公开(公告)号：CN102277311B
公开(公告)日：2012-12-05
申请号：CN201010513015.X
申请日：2010-10-20
Applicant: 淮海工学院
Abstract: 本发明是一种链霉菌HT-18（Streptomyces sp.HT-18）CGMCCNO.3979。将菌株HT-18接种于种子培养基中28℃、150r/min振荡培养1天制成种子液；然后按1％接种量接种于发酵培养基中，调节初始pH为6.5，装液量为90mL/250mL，于31℃、180r/min振荡培养3天；培养后的发酵液经抽滤去除菌体，调pH至2-3，静置过夜，5000r/min离心20min后的沉淀在5mol/L的HCl中浸泡4h，之后2次无水乙醇、1次丙酮依次洗涤，烘干后即得纯化的黑色素。是一株分离自海洋的产黑色素菌株HT-18，它可以发酵生产黑色素；其生产工艺简单，操作方便，所产的黑色素可以广泛地应用在医疗、食品和化妆品工业中。
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公开(公告)号：CN101131385B
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN200710132449.3
申请日：2007-09-17
Applicant: 淮海工学院
CPC classification number: Y02A20/206
Abstract: 本发明是一种褶皱臂尾轮虫微核的制备技术，其特征在于，水体中环境污染物(如重金属镉离子)可以对水体中大量生存的浮游生物--轮虫产生毒性，在细胞水平上表现为轮虫卵母细胞的核分裂受到影响，可以产生小的细胞核，即微核，统计这种微核出现的次数，计算微核率，进一步可以以微核率的大小来衡量环境污染物的毒性大小。本发明以重金属镉离子对轮虫细胞微核率的影响为例，具体阐述了褶皱臂尾轮虫微核的制备方法，包括轮虫攻毒、压片、染色和观察等几个操作步骤，摘要附图中显示了轮虫细胞微核的大小和形态。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106852289B
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201710020890.6
申请日：2017-01-12
Applicant: 淮海工学院
IPC: A01K61/59
Abstract: 一种提高日本蟳幼体成活率的方法，包括抱卵蟹的消毒、幼体的收集、活饵料的消毒、多种饵料的组合等步骤。该方法中的中肋骨条藻、小球藻与活轮虫、卤虫无节幼体进行组合投喂的方法不仅可以调控水质，使水质不易恶化，而且可以满足日本蟳幼体的营养需求，使日本蟳幼体顺利蜕皮变态发育，从而提高幼体的成活率。对抱卵蟹及活饵料的轮虫及卤虫无节幼体进行消毒处理，防止丝状细菌病病原被带入培育池，有效预防在日本蟳幼体培育过程中爆发丝状细菌病。本发明针对日本蟳幼体发育的特点，科学合理，提高了日本蟳幼体的成活率，有利于推动日本蟳养殖业的快速发展。
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公开(公告)号：CN108410906A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810177881.2
申请日：2018-03-05
Applicant: 淮海工学院
Abstract: 本发明公布了一种适用于海洋甲壳类线粒体基因组的CRISPR/Cpf1基因编辑方法。该方法通过在CRISPR/Cpf1表达质粒中引入海洋甲壳类线粒体定位的MLS信号，并通过后续的gRNA设计、显微注射受精卵、受精卵的离体培养和编辑效果检测，完成对海洋甲壳类线粒体基因组的编辑。利用该方法，可以实现海洋甲壳类线粒体基因组的定向编辑，对于在海洋甲壳类线粒体基因组中引入人工增殖放流标志具有重要的价值。
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公开(公告)号：CN104611418A
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201410820919.5
申请日：2014-12-25
Applicant: 淮海工学院
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/683 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明是一种三疣梭子蟹线粒体基因组甲基化位点标记检测技术，其特征是首先提取三疣梭子蟹线粒体基因组DNA，然后利用重亚硫酸氢盐对该线粒体基因组DNA进行处理，在此基础上利用设计的甲基化引物对该处理后的基因组DNA进行PCR扩增，并对获得的扩增产物进行测序分析，从中获得了一个含有甲基化位点的序列，进而确立了扩增该甲基化位点序列的PCR引物，利用该引物可以确定不同亲本及其子代的遗传特征。本发明适用于三疣梭子蟹种质鉴定、增殖放流标记等研究。
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公开(公告)号：CN104604757A
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201410245722.3
申请日：2014-06-06
Applicant: 淮海工学院
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81 , Y02A40/824 , A01K61/59
Abstract: 本发明是一种三疣梭子蟹苗种质量检测技术，是以不同重金属离子组成的逆性环境体系来检测苗种质量的检测方法，属于水产养殖学领域，其特征在于利用正交试验设计获得一个适合于区分不同苗种质量的逆性环境体系及应用此体系可以区分出不同苗种质量差异的检测时间范围。其技术方案要点是，首先利用正交试验设计获得一个区分三疣梭子蟹幼蟹活力的逆性环境体系：Fe2+为4.47mg/L、Mn2+为56.23mg/L、Hg2+为0.5mg/L、Cu2+为5.01mg/L和Zn2+为10mg/L；其次，利用该体系获得一个评价苗种质量的指标，即致死时间0-2.5小时的苗种质量较差；致死时间2.6-3.5小时的苗种质量中等；致死时间3.5小时以上的为优质苗种。此发明可以为三疣梭子蟹池塘养殖放苗前的苗种质量评价提供定量依据。
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公开(公告)号：CN102277311A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201010513015.X
申请日：2010-10-20
Applicant: 淮海工学院
Abstract: 本发明是一种链霉菌HT-18（Streptomyces sp.HT-18）CGMCC No.3979。将菌株HT-18接种于种子培养基中28℃、150r/min振荡培养1天制成种子液；然后按1％接种量接种于发酵培养基中，调节初始pH为6.5，装液量为90mL/250mL，于31℃、180r/min振荡培养3天；培养后的发酵液经抽滤去除菌体，调pH至2-3，静置过夜，5000r/min离心20min后的沉淀在5mol/L的HCl中浸泡4h，之后2次无水乙醇、1次丙酮依次洗涤，烘干后即得纯化的黑色素。是一株分离自海洋的产黑色素菌株HT-18，它可以发酵生产黑色素；其生产工艺简单，操作方便，所产的黑色素可以广泛地应用在医疗、食品和化妆品工业中。
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