公开(公告)号：CN116875667A

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202310932076.7

申请日：2023-07-26

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋一清 ,  尹晓强 ,  张鑫 ,  李洲权 ,  刘宇明 ,  洪李川 ,  张思源 ,  曾金凤 ,  张娜 ,  谢松光

IPC: C12Q1/686 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种基于花鳗鲡的PCR扩增引物、探针及检测方法，包括以下步骤：(1)以花鳗鲡mtDNA的D‑loop基因作为检测靶基因，设计上游引物、下游引物和探针；(2)将花鳗鲡PCR扩增体系加入仪器，设置PCR反应条件，进行实时荧光PCR扩增反应，记录荧光增长曲线；所述实时荧光PCR扩增反应的具体步骤包括：预孵育、两步扩增和两次冷却。本发明采用花鳗鲡引物HMLF1、HMLR1和探针HMLP1进行实时荧光PCR检测，能够特异性检测花鳗鲡。本发明的检测方法成本低，操作简单，精确度高，响应速度快，高通量，能够用于指导花鳗鲡自然种群资源的检测和保护。

公开(公告)号：CN116875667B

公开(公告)日：2024-11-29

申请号：CN202310932076.7

申请日：2023-07-26

Applicant: 海南大学

Inventor： 宋一清 ,  尹晓强 ,  张鑫 ,  李洲权 ,  刘宇明 ,  洪李川 ,  张思源 ,  曾金凤 ,  张娜 ,  谢松光

IPC: C12Q1/686 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种基于花鳗鲡的PCR扩增引物、探针及检测方法，包括以下步骤：(1)以花鳗鲡mtDNA的D‑loop基因作为检测靶基因，设计上游引物、下游引物和探针；(2)将花鳗鲡PCR扩增体系加入仪器，设置PCR反应条件，进行实时荧光PCR扩增反应，记录荧光增长曲线；所述实时荧光PCR扩增反应的具体步骤包括：预孵育、两步扩增和两次冷却。本发明采用花鳗鲡引物HMLF1、HMLR1和探针HMLP1进行实时荧光PCR检测，能够特异性检测花鳗鲡。本发明的检测方法成本低，操作简单，精确度高，响应速度快，高通量，能够用于指导花鳗鲡自然种群资源的检测和保护。