公开(公告)号：CN120060510A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510120311.X

申请日：2025-01-25

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  何源 ,  万逸 ,  陈菲

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6816 ,  C12N9/22 ,  C12N9/12 ,  C12N15/113 ,  C07K19/00 ,  C12R1/63

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种基于OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的可视化检测器及其应用。本申请将CRISPR‑Cas系统中的Cas13蛋白与OAS蛋白重组构建融合蛋白，以Cas13蛋白中REC结构域作为crRNA识别器，crRNA的二级结构中凸起的茎环结构作为直接重复序列与Cas13蛋白中REC结构域结合，同时crRNA包含的靶RNA特异性互补序列与检测样本靶链结合形成RNA双链激活OAS蛋白部分，OAS蛋白在短dsRNA和ATP的结合下所产生的PPi可以通显色测定，从而可以定量、定性测定食品样本中的霍乱弧菌。本申请基于融合蛋白的检测方法操作简便，具有极高的灵敏度和特异性，为食品中病原菌的检测提供了一种高效的新策略。

公开(公告)号：CN120060207A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510120312.4

申请日：2025-01-25

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  何源 ,  万逸 ,  辛煜 ,  崔倩

IPC: C12N9/22 ,  C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的纯化工艺。本申请根据常规蛋白纯化工艺中的试剂进行优化，提供了一种在大肠杆菌中表达的OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的纯化工艺，对细菌裂解液以及层析柱中的亲和平衡液、亲和洗脱液进行改进优化，不仅提高OAS1‑Cas13aREC融合蛋白的产量和蛋白纯度，而且防止蛋白氧化和稳定蛋白结构，使其不易变性。

公开(公告)号：CN118191024A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202311861543.8

申请日：2023-12-29

Applicant: 海南大学

Inventor： 曾姝 ,  陈菲 ,  万逸 ,  何源

IPC: G01N27/02 ,  G01N27/36 ,  G01N27/327 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/6844

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，公开了一种基于CRISPR/dCas9的电化学生物传感器及其在线粒体DNA检测中的应用。本申请借助CRISPR原理，以dCas9‑sgRNA复合物作为识别分子修饰在工作电极表面特异性捕获目标DNA，释放目标DNA的非结合链作为引发链发生HCR反应，在工作电极表面引发了发夹自组装产生dsDNA聚合物；聚乙烯亚胺‑银纳米粒子沉积在dsDNA聚合物骨架上加速电子转移速率，从而显著放大电化学信号，实现了目标物的灵敏、快速和特异检测。