公开(公告)号：CN116376804B

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202310492209.3

申请日：2023-04-28

Applicant: 海南大学

Inventor： 吴文嫱 ,  夏薇 ,  黄东益 ,  张金兰 ,  梅朋飞 ,  庄赛伟 ,  刘铭

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明提供一种参薯原生质体的制备方法与应用，本发明包括以下步骤：取参薯组培苗嫩叶，并切成0.5‑1.0mm的条带；在切割过程中，将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上，并将叶片放入酶溶液中酶解3‑9h；所述酶溶液包括0.4‑1.2w/w％纤维素酶、0.5‑1.5w/w％离析酶、0.01～0.03w/w％果胶酶；用W5溶液洗涤，过滤，过滤时用W5溶液洗涤，过滤后，通过离心收集叶片释放的原生质体，并将其重新悬浮在W5溶液中。本发明可以获得更高的参薯原生质体产量，且原生质体活力达到92％以上。本发明可以高效的获得大量高活力的参薯原生质体，为蛋白质亚细胞定位以及基因功能分析提供良好的实验材料。

公开(公告)号：CN116376804A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202310492209.3

申请日：2023-04-28

Applicant: 海南大学

Inventor： 吴文嫱 ,  夏薇 ,  黄东益 ,  张金兰 ,  梅朋飞 ,  庄赛伟 ,  刘铭

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明提供一种参薯原生质体的制备方法与应用，本发明包括以下步骤：取参薯组培苗嫩叶，并切成0.5‑1.0mm的条带；在切割过程中，将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上，并将叶片放入酶溶液中酶解3‑9h；所述酶溶液包括0.4‑1.2w/w％纤维素酶、0.5‑1.5w/w％离析酶、0.01～0.03w/w％果胶酶；用W5溶液洗涤，过滤，过滤时用W5溶液洗涤，过滤后，通过离心收集叶片释放的原生质体，并将其重新悬浮在W5溶液中。本发明可以获得更高的参薯原生质体产量，且原生质体活力达到92％以上。本发明可以高效的获得大量高活力的参薯原生质体，为蛋白质亚细胞定位以及基因功能分析提供良好的实验材料。