公开(公告)号：CN114959050A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202111527499.8

申请日：2021-12-15

Applicant: 浙江省淡水水产研究所

Inventor： 刘士力 ,  卞玉玲 ,  刘一诺 ,  贾永义 ,  迟美丽 ,  李飞 ,  郑建波 ,  程顺 ,  顾志敏

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种基于四碱基微卫星荧光多重PCR的红螯螯虾亲子鉴定方法，属于生物工程技术领域，本发明包括以下步骤：（1）提取待测样本基因组DNA；（2）红螯螯虾微卫星引物的筛选（3）多重PCR扩增体系的构建将步骤（2）的20对引物按照120‑200bp、220‑260bp、280‑340bp、360‑420bp、440bp‑500bp的区间进行分组，选出扩增组合，获得多组多重PCR扩增体系；（4）亲子鉴定待测样本基因组DNA扩增，得到多重PCR产物，分型，读取亲本及子代基因型，判断亲子关系。本发明能够实现多种引物之间不存在相互作用、不产生非特异扩增、不使扩增产物重叠。在PCR扩增的过程中同时扩增多个目的片段，能够达到节约实验样品、实验成本、提高实验效率的目的，并且对红螯螯虾达到100％的亲子鉴定成功率。