公开(公告)号：CN119286745A

公开(公告)日：2025-01-10

申请号：CN202411405705.1

申请日：2024-10-10

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  马艺璇 ,  黄良刚 ,  鲍双双 ,  逄爱萍 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N9/88 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N9/00 ,  C12N9/04 ,  C12P13/04 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及微生物代谢工程技术领域，尤其涉及一种高效生产D‑泛酸的谷氨酸棒杆菌生产菌、构建方法及应用。所述构建方法具体包括如下步骤：（1）以野生型谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为底盘，弱化ilvA，突变表达构建DPA1；（2）敲除丙酮酸醌氧化还原酶并在其插入一个panBCE基因表达框，构建DPA2；（3）在DPA2中导入使用pEC‑xk99E过表达质粒筛选表达Escherichia coli W3110、Bacillus subtilis 168、以及内源性的乙酰羟酸合酶、乙酰乳酸异构还原异构酶和2‑羟酸脱水酶；（4）对筛选出的ilvBNCD基因在强启动子控制下，由pEC‑xk99E进行串联过表达，构建DPA3，加强泛酸主合成途径以及上游途径拉动力，即得所述高效生产D‑泛酸的谷氨酸棒杆菌。本发明提供的菌株能够利用碳源高产量和高转化率的生产D‑泛酸，具有重要的工业应用价值。