公开(公告)号：CN118931936A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202411039223.9

申请日：2024-07-31

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  宋伊欣 ,  黄良刚 ,  李宁宁 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/53 ,  C12N1/15 ,  C12P27/00 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明提供了一种高产赤霉素GA3的藤仓赤霉菌基因工程菌、构建方法及应用。本发明采用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，敲除出发菌株藤仓赤霉菌Fusariumfujikuroi基因组上比卡维林合成基因簇关键基因bik3，并在该位点异源表达来源于解脂耶氏酵母的截断甲羟戊二酸单酰辅酶A还原酶基因tHMGR，进一步分别在bik1和bik2基因位点连续整合多拷贝tHMGR。该基因工程菌在生产赤霉素GA3过程中提高了前体IPP和DMAPP的供应力，经过168h发酵培养基发酵后GA3产量达2.54g/L，相较于出发菌株GA3产量提高40.33％。

公开(公告)号：CN119391742A

公开(公告)日：2025-02-07

申请号：CN202411600203.4

申请日：2024-11-11

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  高洁 ,  黄良刚 ,  宋伊欣 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/53 ,  C12N15/52 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12P27/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种生产赤霉素GA4+7的基因工程菌及其构建方法和应用。所述基因工程菌采用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，在底盘菌藤仓赤霉菌Fusariumfujikuroi基因组中P450‑3基因位点插入截断的甲羟戊二酸单酰辅酶A还原酶编码基因tHMGR，并进一步在fsr1、fsr3、fsr4位点分别插入POT1、FOX1、FAA1基因来实现β氧化途径的强化。该基因工程菌在生产赤霉素GA4+7过程中提高了前体乙酰CoA的供应力，经过168h发酵培养基发酵后GA4+7产量达2.66g/L，相较于出发菌株GA4+7产量提高443.33％。

公开(公告)号：CN119530027A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411679681.9

申请日：2024-11-22

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  李宁宁 ,  黄良刚 ,  宋伊欣 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/31 ,  C12P27/00 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明涉及代谢工程技术领域，公开了一种副产物消除的赤霉素高产菌、其构建方法与应用。藤仓赤霉菌中，比卡菌素基因簇和镰刀菌素基因簇较大，比卡菌素基因簇大小约为17 kb，镰刀菌素基因簇大小约为16.8 kb，因此，同时敲除比卡菌素和镰刀菌素基因簇难度较大。本发明通过CRISPR‑Cas9基因编辑技术，实现了比卡菌素和镰刀菌素基因簇的同时敲除，由此消除发酵副产物比卡菌素和镰刀菌素的影响，并增加赤霉素合成，得到高产赤霉素的基因工程菌株。