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公开(公告)号：CN100565187C
公开(公告)日：2009-12-02
申请号：CN200710071203.X
申请日：2007-09-06
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种用于除草剂高通量的96孔板筛选方法，所述方法如下：采用适用于小球藻的培养基，将指数生长期的小球藻接种于96孔板中，初始接种小球藻个数范围为7～8×105个/mL，接种后往各孔加入具有浓度梯度的除草剂，每个浓度设置2～5个平行样，同时设置空白样对照；培养条件：温度25±0.2℃，光照2000Lx，持续光照，用保鲜膜封口，不加营养液，每天对藻液充气4～5次，共培养72～144h，每天测试样品在630nm处的吸光度，根据吸光度和除草剂浓度间的关系，推算除草剂对小球藻的EC50。本发明相比三角瓶法的有益效果主要体现在：大为缩小了筛选过程中的除草剂使用量，且操作简便、快速，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN101148660B
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN200710071204.4
申请日：2007-09-06
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N9/16
Abstract: 本发明提供了一种乙酸萘酯酶的提取方法，所述方法包括如下顺序步骤：(1)将植物种子去皮磨粉，0～4℃下、用蒸馏水浸泡12～18h，取上清液离心，取上清液，得酯酶粗提液；(2)冰浴条件下，往酯酶粗提液中加入硫酸铵，使酶液中硫酸铵饱和度为50～75％，再于离心，取沉淀，用pH6～7的磷酸缓冲液稀释2～10倍，得稀释后的酶液；(3)将稀释后的酶液用蒸馏水透析，直至不产生沉淀为止，酶液再经浓缩、干燥，得所述乙酸萘酯酶。本发明所提供的乙酸萘酯酶提取方法，其原料来源广泛，制备工艺简单稳定，生产成本低，提取酶后的副产物无毒无害，可作其它原料用。经测定，产品用于对有机磷农药残留的检测，具有很高的灵敏度。
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公开(公告)号：CN101126712A
公开(公告)日：2008-02-20
申请号：CN200710071203.X
申请日：2007-09-06
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种用于除草剂高通量的96孔板筛选方法，所述方法如下：采用适用于小球藻的培养基，将指数生长期的小球藻接种于96孔板中，初始接种小球藻个数范围为7～8×105个/mL，接种后往各孔加入具有浓度梯度的除草剂，每个浓度设置2～5个平行样，同时设置空白样对照；培养条件：温度25±0.2℃，光照2000Lx，持续光照，用保鲜膜封口，不加营养液，每天对藻液充气4～5次，共培养72～144h，每天测试样品在630nm处的吸光度，根据吸光度和除草剂浓度间的关系，推算除草剂对小球藻的EC50。本发明相比三角瓶法的有益效果主要体现在：大为缩小了筛选过程中的除草剂使用量，且操作简便、快速，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN101148660A
公开(公告)日：2008-03-26
申请号：CN200710071204.4
申请日：2007-09-06
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N9/16
Abstract: 本发明提供了一种乙酸萘酯酶的提取方法，所述方法包括如下顺序步骤：(1)将植物种子去皮磨粉，0～4℃下、用蒸馏水浸泡12～18h，取上清液离心，取上清液，得酯酶粗提液；(2)冰浴条件下，往酯酶粗提液中加入硫酸铵，使酶液中硫酸铵饱和度为50～75％，再于离心，取沉淀，用pH6～7的磷酸缓冲液稀释2～10倍，得稀释后的酶液；(3)将稀释后的酶液用蒸馏水透析，直至不产生沉淀为止，酶液再经浓缩、干燥，得所述乙酸萘酯酶。本发明所提供的乙酸萘酯酶提取方法，其原料来源广泛，制备工艺简单稳定，生产成本低，提取酶后的副产物无毒无害，可作其它原料用。经测定，产品用于对有机磷农药残留的检测，具有很高的灵敏度。
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