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公开(公告)号：CN116536300A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310521234.X
申请日：2023-05-10
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N11/089 , C12N11/091 , C12N9/02 , C12N9/04 , C12P17/04
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种固定化双酶树脂及其制备方法与应用。本发明的固定化双酶树脂简单、酶活回收率高达90％以上、蛋白回收效率达65％。多次使用后固定化双酶树脂的活力剩余高、转化率高，蛋白载量可达250mg/g，明显高于已有报道的通过包埋(20mg/g)等固定化方法的蛋白载量。本发明的固定化双酶树脂酶活高、循环稳定性高、有效提高辅酶的循环利用，具有机械强度高、生物相容性好、环境耐受性强、不易失活、稳定性高的优良特性。本发明的固定化双酶树脂用于催化制备(R)‑二氢‑4‑丙基‑2(3H)‑呋喃酮具有产物选择性高、工艺操作简单、固废和产品损失低、产品收率高，有效降低反应成本等优势。
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公开(公告)号：CN116536299A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310563082.X
申请日：2023-05-18
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种仿生矿化包埋固定双酶的杂化载体，所述杂化载体为核壳结构，其壳为明胶和磷酸钙的复合物，其核为海藻酸钙凝胶，双酶包埋于所述海藻酸钙凝胶中；所述双酶包括烯酮还原酶和脱氢酶。所述杂化载体以海藻酸钙凝胶为内核，并在外表面构建基于生物材料的硬壳，为生物酶提供一个相对稳定的内环境，同时避免海藻酸钙凝胶受损，提高其应用特性，使其具备酶泄露少，耐化学环境变化强，耐机械作用力高，循环稳定性强等特点，可通过鼓泡或搅拌等混合方式，均匀分散于催化反应体系中，提高酶催化反应效率，且在水中无明显溶胀。所述仿生矿化包埋固定双酶的杂化载体应用于手性合成布瓦西坦中间体中，为生物医药、食品行业，酶工程领域提供了一种新型且普遍适用的双酶包埋固定化方法。
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公开(公告)号：CN118813571A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202411047728.X
申请日：2024-08-01
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明属于生物催化领域，具体涉及蔗糖磷酸化酶突变体、编码基因及其在白藜芦醇葡萄糖苷中的应用。所述蔗糖磷酸化酶突变体由Bifidobacterium lactis或Bifidobacterium adolesc来源的蔗糖磷酸化酶其第135位精氨酸、第344位酪氨酸进行单突变或多点联合突变获得。蔗糖磷酸化酶突变体对白藜芦醇糖基化的比酶活是野生型的100～5000倍，且催化合成3‑α‑G‑Res的浓度可达到70g/L。底物(E)‑白藜芦醇的转化率>95％，而野生型酶的转化率仅为0.02％。合成的糖苷产物中，3‑α‑G‑Res纯度＞99％，表现出优良的区域选择性。蔗糖磷酸化酶突变体可以更好地应用于生物催化领域，对3‑α‑G‑Res的工业化生产及应用有重要意义。
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公开(公告)号：CN117402867A
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202311503075.7
申请日：2023-11-13
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种产甘油葡萄糖苷的蔗糖磷酸化酶的固定化方法、固定化酶及应用，其特征在于，包括以下步骤：(1)向所述蔗糖磷酸化酶的原始粗酶液中添加甘油葡萄糖苷溶液，搅拌后得到处理粗酶液；(2)向所述处理粗酶液中依次加入沉淀剂、交联剂，搅拌后得到含有非水溶性的交联酶聚集体的悬浊液；(3)往所述悬浊液中加入反应试剂，搅拌后得到终止交联反应的悬浊液，将终止交联反应的悬浊液抽滤洗涤，干燥后得到固定化酶；其中，所述处理粗酶液为含有甘油葡萄糖苷印迹分子的蔗糖磷酸化酶的粗酶液。本方法制备的固定化酶的催化活性、酶活回收率高，循环稳定性强。
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