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公开(公告)号:CN113106150B
公开(公告)日:2022-05-24
申请号:CN202110517750.6
申请日:2021-05-12
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞测序方法,本发明超高通量单细胞测序方法通过分子标记微珠、反转录序列、桥连引物的使用,先使用反转录序列对细胞内进行一次细胞内反转录,再将经细胞内反转录后的细胞通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞,反转录后得到的序列在桥连引物的帮助下与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得cDNA测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性转录组信息。大大提高了单细胞测序的通量。
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公开(公告)号:CN115011679A
公开(公告)日:2022-09-06
申请号:CN202210594161.2
申请日:2021-05-12
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞测序方法,本发明超高通量单细胞测序方法通过分子标记微珠、反转录序列、桥连引物的使用,先使用反转录序列对细胞内进行一次细胞内反转录,再将经细胞内反转录后的细胞通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞,反转录后得到的序列在桥连引物的帮助下与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得cDNA测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性转录组信息。大大提高了单细胞测序的通量。
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公开(公告)号:CN113604545B
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202110911428.1
申请日:2021-08-09
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869 , B29C67/20 , B29C39/02
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞染色质转座酶可及性测序方法,本发明先使用特异性分子标签转座酶包埋复合物进行细胞核内染色质转座酶可及性基因组序列的转座,再将细胞核通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞核处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞核,在桥连引物的帮助下将特异性分子标签序列与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性基因组开放性信息,大大提高了单细胞测序的通量,积极推动基于微孔板的单细胞高通量染色质转座酶可及性测序技术的发展。
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公开(公告)号:CN114958996A
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202210590187.X
申请日:2021-05-12
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞测序试剂组合,利用本发明超高通量单细胞测序试剂组合,通过分子标记微珠、反转录序列、桥连引物的使用,先使用反转录序列对细胞内进行一次细胞内反转录,再将经细胞内反转录后的细胞通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞,反转录后得到的序列在桥连引物的帮助下与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得cDNA测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性转录组信息。大大提高了单细胞测序的通量。
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公开(公告)号:CN107208055A
公开(公告)日:2017-09-26
申请号:CN201580072367.7
申请日:2015-12-29
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0735 , C12N5/074 , C12N5/0775 , C12N5/0789 , C12N5/0797 , C12N5/095 , C07K14/74 , A61K48/00
CPC classification number: C12N5/0606 , A61K35/545 , C12N5/0603 , C12N5/0639 , C12N2510/00
Abstract: 本申请描述了与遗传性修饰的干细胞相关的组合物,方法和系统。与相应的野生型细胞相比,被修饰细胞的主要组织相容性复合体II(MHC II)较少。同时,与相应的野生型细胞相比,被修饰细胞具有降低的免疫原性。
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公开(公告)号:CN115011679B
公开(公告)日:2023-04-11
申请号:CN202210594161.2
申请日:2021-05-12
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞测序方法,本发明超高通量单细胞测序方法通过分子标记微珠、反转录序列、桥连引物的使用,先使用反转录序列对细胞内进行一次细胞内反转录,再将经细胞内反转录后的细胞通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞,反转录后得到的序列在桥连引物的帮助下与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得cDNA测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性转录组信息。大大提高了单细胞测序的通量。
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公开(公告)号:CN114958996B
公开(公告)日:2022-12-20
申请号:CN202210590187.X
申请日:2021-05-12
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞测序试剂组合,利用本发明超高通量单细胞测序试剂组合,通过分子标记微珠、反转录序列、桥连引物的使用,先使用反转录序列对细胞内进行一次细胞内反转录,再将经细胞内反转录后的细胞通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞,反转录后得到的序列在桥连引物的帮助下与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得cDNA测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性转录组信息。大大提高了单细胞测序的通量。
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公开(公告)号:CN113604545A
公开(公告)日:2021-11-05
申请号:CN202110911428.1
申请日:2021-08-09
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6869 , B29C67/20 , B29C39/02
Abstract: 本发明公开了一种超高通量单细胞染色质转座酶可及性测序方法,本发明先使用特异性分子标签转座酶包埋复合物进行细胞核内染色质转座酶可及性基因组序列的转座,再将细胞核通过微孔板技术或微流控技术使一个分子标记微珠与一个或多个细胞核处于分隔的空间中,并在裂解液作用下裂解细胞核,在桥连引物的帮助下将特异性分子标签序列与分子标记微珠上的分子标记序列连接,并通过PCR扩增获得大量序列,构建获得测序文库,然后进行高通量测序,一次测序便可以获得上百万个单细胞的特异性基因组开放性信息,大大提高了单细胞测序的通量,积极推动基于微孔板的单细胞高通量染色质转座酶可及性测序技术的发展。
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公开(公告)号:CN107208055B
公开(公告)日:2021-06-15
申请号:CN201580072367.7
申请日:2015-12-29
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0735 , C12N5/074 , C12N5/0775 , C12N5/0789 , C12N5/0797 , C12N5/095 , C07K14/74 , A61K48/00
Abstract: 本申请描述了与遗传性修饰的干细胞相关的组合物,方法和系统。与相应的野生型细胞相比,被修饰细胞的主要组织相容性复合体II(MHC II)较少。同时,与相应的野生型细胞相比,被修饰细胞具有降低的免疫原性。
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公开(公告)号:CN114774527A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210550351.4
申请日:2022-05-20
Applicant: 良渚实验室 , 浙江大学 , 杭州跃真生物科技有限公司
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/6806 , C40B50/06
Abstract: 本发明提供了一种高通量的单细胞转录组测序方法及其应用,所述方法包括将待测的细胞样本制备成单细胞悬液后用固定液固定;和使用反转录引物在固定后的单细胞的RNA上进行原位反转录反应合成cDNA第一条链;其中所述反转录引物中包括标签序列。
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