公开(公告)号：CN117683722A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202310758297.7

申请日：2023-06-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 孙洁 ,  王亚杰 ,  蒋婕 ,  古莹 ,  周春 ,  段艳婷 ,  廖婵

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明涉及一种治疗性细胞或其前体细胞的制备方法，该制备方法将结合靶点抗原的受体基因定点整合至治疗性细胞及前体细胞靶点基因位点，从而在敲除/破坏治疗性细胞及前体细胞中的靶点基因的同时，将结合靶点抗原的受体基因定点整合至靶点基因位点，从技术手段上实现了敲除与定点整合两个步骤的二合一；通过本发明的方法可以敲除/破坏受体基因的靶点，避免治疗性细胞间的自相残杀，不仅提高了生产效率，还能够提高治疗性细胞在体外扩增时的活率，提高治疗性细胞在体外扩增的产量，减少治疗性细胞在体外的耗竭，更为重要的是能够增强治疗性细胞在体内的抗肿瘤疗效，具有良好的临床应用前景。

公开(公告)号：CN118745441A

公开(公告)日：2024-10-08

申请号：CN202411007356.8

申请日：2024-07-25

Applicant: 浙江大学

Inventor： 顾臻 ,  李洪军 ,  王亚杰 ,  孙洁 ,  廖紫妍 ,  史佳齐 ,  冯慧珩

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/89 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  A01K67/0278

Abstract: 本发明提供了一种CAR‑细胞的制备方法及其应用，属于细胞治疗技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将CAR基因敲入到小鼠受精卵中的CD3基因位点上，从而构建出能产生CAR‑T细胞的转基因小鼠，继而通过分离转基因小鼠脾脏中的阳性T细胞来制备CAR‑T细胞，且制备得到的CAR‑T细胞能高效且特异性地杀死肿瘤细胞；通过分离转基因小鼠的阳性T细胞来获得CAR‑T细胞可缩短CAR‑T细胞的制备周期、提高CAR基因转导效率和T细胞活率、缩小批次间CAR‑T细胞的差异和降低成本。该方法还可以用于制备CAR‑NK细胞等，只要针对在该细胞中特异性表达的基因来设计基因编辑系统，即可通过本发明提供的方法来制备CAR‑细胞。