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公开(公告)号：CN112451996B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202011245944.7
申请日：2020-11-10
Applicant: 浙江大学
IPC: B01D15/08
Abstract: 本发明公开了一种多柱连续流层析捕获蛋白的优化方法，包括以下步骤：步骤1，在设定的上样蛋白浓度和任意上样保留时间的条件下，进行一次蛋白穿透实验，得到蛋白穿透曲线；步骤2，在目标设定的穿透百分比例下，积分穿透曲线，得到单柱载量，建立连接上样时间和上样保留时间的线性关系；步骤3，利用步骤2得到的线性关系，求解连续流层析捕获蛋白的最优操作柱数；步骤4，利用步骤2得到的线性关系和步骤3得到的最优操作柱数，求解连续流层析捕获蛋白的最优上样保留时间；步骤5，利用步骤4得到的最优上样保留时间，求解连续流层析捕获蛋白的最大生产力。
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公开(公告)号：CN110339829A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201910653506.5
申请日：2019-07-19
Applicant: 浙江大学
IPC: B01J20/286 , B01J20/30
Abstract: 本发明公开了一种以氨基苯(磺)酰胺吡啶为功能配基的层析介质。以亲水性多孔微球为层析基质，层析基质中依次加入二甲基亚砜和烯丙基溴进行活化；活化的层析基质与N-溴代丁二酰亚胺反应，进行溴代醇化；将溴代醇化后的层析基质偶联氨基苯(磺)酰胺吡啶配基；最后采用乙醇胺水溶液对未反应的溴代醇化末端进行封闭，得到以氨基苯(磺)酰胺吡啶为功能基团的混合模式层析介质。本发明的新型层析介质具有抗体吸附容量大、选择性高、非盐依赖吸附的特性，通过改变溶液pH至弱酸性即可实现解吸和回收，制备过程简便，价格低廉，可以用于混合模式层析分离抗体。
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公开(公告)号：CN110240649A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910653498.4
申请日：2019-07-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种从人血液中分离抗体的混合模式层析方法。具体步骤如下：1)预处理，人血液样品，加抗凝剂，离心取上清液，得到血浆；2)层析分离，采用磺胺吡啶为配基的混合模式介质，固定床层析分离血浆，上样pH值6.0～9.0，稀释率0～3.0，洗脱pH值3.0～5.0，收集洗脱峰；3)脱盐和干燥，洗脱收集液脱盐，冷冻干燥，得到纯度大于95％的抗体。本发明的特色在于可以从人血液中直接分离得到高纯度的抗体，方法的关键在于采用了以磺胺吡啶为配基的混合模式层析介质，不用调整血液离子强度和pH条件下吸附抗体，弱酸性条件下洗脱，具有选择性强、洗脱条件温和、抗体收率和纯度高、工艺简单、成本低廉等特点。
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公开(公告)号：CN108558988B
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201810225371.8
申请日：2018-03-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及一种组合型配基、组合型仿生层析介质及其制备方法和应用，其中组合型仿生层析介质以亲水性多孔微球为层析基质，采用烯丙基溴活化，N‑溴代丁二酰亚胺溴代醇化，然后偶联组合型配基。组合型配基的序列为苯丙氨酸‑酪氨酸‑谷氨酸‑5‑氨基苯并咪唑。该组合型仿生层析介质同时具有苯丙氨酸‑酪氨酸‑谷氨酸三肽和氨基苯并咪唑两种功能基团，在保留多肽配基对抗体选择性高的特点上，引入疏水电荷诱导配基，使得洗脱条件更加温和，能实现有效地抗体分离。
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公开(公告)号：CN108191956A
公开(公告)日：2018-06-22
申请号：CN201711419375.1
申请日：2017-12-25
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及一种组合型配基、组合型仿生层析介质及其制备方法和应用，其中组合型仿生层析介质以亲水性多孔微球为层析基质，采用烯丙基溴活化，N-溴代丁二酰亚胺溴代醇化，然后偶联组合型配基。组合型配基的序列为苯丙氨酸-酪氨酸-谷氨酰胺-5-氨基苯并咪唑。该组合型仿生层析介质同时具有苯丙氨酸-酪氨酸-谷氨酰胺三肽和氨基苯并咪唑两种功能基团，在保留多肽配基对抗体选择性高的特点上，引入疏水电荷诱导配基，使得洗脱条件更加温和，能实现有效地抗体分离。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107033236A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710317433.3
申请日：2017-05-05
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K14/765 , C07K1/16
CPC classification number: C07K14/765
Abstract: 本发明公开了一种从酵母发酵液中分离人血白蛋白的混合模式层析方法，属于生物化工领域中的蛋白质层析分离技术。具体步骤如下：1)发酵液预处理，取含有人血白蛋白的酵母发酵液，离心去除酵母细胞，加入辛酸钠，加热，去除杂蛋白和灭活蛋白酶，离心分离，取上清液；2)柱层析，采用色氨酸为配基的混合模式介质，固定床层析分离上清液，上样pH值4.0～4.5，洗脱pH值7.0～9.0，收集洗脱峰。3)脱盐和干燥，将收集液脱盐，冷冻干燥，得到纯度大于95％的人血白蛋白。本发明的特色在于开发了一种新的分离工艺，可以从酵母发酵液中直接分离得到高纯度的人血白蛋白。方法的关键在于采用了以色氨酸为配基的混合模式介质，酵母发酵液无需调整离子强度，酸性条件下吸附，中性和弱碱性洗脱，具有洗脱条件温和、工艺简单、分离效率高、收率高的特点。
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公开(公告)号：CN104177642B
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201410398568.3
申请日：2014-08-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C08J9/26 , C08L33/26 , C08F251/00 , C08F220/56 , C08F2/32 , B01J20/26 , B01D15/08
Abstract: 本发明公开了一种扩张床吸附基质及其制备方法。1）将丙烯酰胺、交联剂及水溶性糊化淀粉胶状液溶解在去离子水中，2）在混合溶液中加入无机增重剂颗粒均匀分散在溶液中；3）将引发剂加入到已分散均匀的溶液中，将该溶液加入到溶有分散剂的连续相（油相）中，组成反相悬浮分散体系；4）加热该反相悬浮分散体系，进行聚合反应；5）反应完成后，去除连续相，经清洗后，加入淀粉酶除去水溶性淀粉，得到复合微球；6）将复合微球过滤、洗涤，湿态筛分，最终得到以聚丙烯酰胺为基本材料的扩张床基质。本发明所开发的扩张床基质，具有球形度好、密度较高、孔径较大、粒径分布合理、机械强度好、生物相容性好、性质稳定以及成本低廉等优点。
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公开(公告)号：CN104117345B
公开(公告)日：2016-09-14
申请号：CN201410198979.8
申请日：2014-05-13
Applicant: 浙江大学
IPC: B01J20/28 , B01J20/282 , B01J20/30
Abstract: 本发明公开了一种具有双功能基团的疏水性电荷诱导层析介质及其制备方法。层析基质依次加入二甲基亚砜和烯丙基溴进行活化；活化基质与N‑溴代丁二酰亚胺反应；将溴代醇化后的基质与色氨酸溶液混合，偶联色氨酸配基；依次用丙酮和二氧六环洗涤，并对色氨酸配基的羧基末端进行活化；活化后依次用丙酮溶液和水洗涤，加入氨基苯并咪唑溶液反应，偶联氨基苯并咪唑配基；最后采用乙醇胺水溶液对未反应的羧基末端进行封闭。本发明所研制的新型层析介质，兼有色氨酸和氨基苯并咪唑两种功能配基，模仿抗体Fc片段特异性结合蛋白的关键位点残基设计，在保留疏水性电荷诱导层析配基的特点上，对抗体的选择性有大幅度提高，可以用于抗体的高效分离。
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公开(公告)号：CN104624171A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201410849889.0
申请日：2014-12-30
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: B01J20/26 , B01D15/32 , B01J20/30 , C07K1/14 , C08J9/405 , C08J9/42 , C08J2301/02 , C08J2305/12
Abstract: 本发明公开了一种聚甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝的疏水性电荷诱导层析介质及其制备方法。以亲水性多孔微球为层析基质，通过活化反应活化层析基质，然后在活化层析基质表面进行甲基丙烯酸缩水甘油酯聚合反应，得到聚合物接枝层析基质，最后偶联疏水性电荷诱导配基，得到聚合物接枝的疏水性电荷诱导层析介质。本发明所开发的层析介质，兼有聚甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝链和疏水性电荷诱导功能配基，配基密度高，在高流速下对抗体等目标蛋白的动态载量明显提高，同时具有非盐依赖的吸附特性，通过改变溶液pH至弱酸性即可实现解吸和回收。新型介质的制备过程简便，接枝反应过程中无需严格除氧，催化剂和配体用量少。
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公开(公告)号：CN104177642A
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201410398568.3
申请日：2014-08-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C08J9/26 , C08L33/26 , C08F251/00 , C08F220/56 , C08F2/32 , B01J20/26 , B01D15/08
Abstract: 本发明公开了一种扩张床吸附基质及其制备方法。1）将丙烯酰胺、交联剂及水溶性糊化淀粉胶状液溶解在去离子水中，2）在混合溶液中加入无机增重剂颗粒均匀分散在溶液中；3）将引发剂加入到已分散均匀的溶液中，将该溶液加入到溶有分散剂的连续相（油相）中，组成反相悬浮分散体系；4）加热该反相悬浮分散体系，进行聚合反应；5）反应完成后，去除连续相，经清洗后，加入淀粉酶除去水溶性淀粉，得到复合微球；6）将复合微球过滤、洗涤，湿态筛分，最终得到以聚丙烯酰胺为基本材料的扩张床基质。本发明所开发的扩张床基质，具有球形度好、密度较高、孔径较大、粒径分布合理、机械强度好、生物相容性好、性质稳定以及成本低廉等优点。
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