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公开(公告)号：CN112852715B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202110251574.6
申请日：2021-03-08
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明提供一种将诱导多能干细胞定向分化为内耳毛细胞样细胞的方法。主要是利用化学成分明确的培养基，适时添加小分子化合物将iPSC诱导分化为内耳祖细胞，再经鸡胚椭圆囊细胞与内耳祖细胞共培养，从而获得内耳毛细胞样细胞。本发明所述方法能够有效地将诱导多能干细胞定向分化为内耳毛细胞样细胞，分化获得的内耳毛细胞样细胞具有纤毛毛束结构，表达内耳毛细胞特异蛋白，具有毛细胞电生理功能。
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公开(公告)号：CN112852715A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110251574.6
申请日：2021-03-08
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明提供一种将诱导多能干细胞定向分化为内耳毛细胞样细胞的方法。主要是利用化学成分明确的培养基，适时添加小分子化合物将iPSC诱导分化为内耳祖细胞，再经鸡胚椭圆囊细胞与内耳祖细胞共培养，从而获得内耳毛细胞样细胞。本发明所述方法能够有效地将诱导多能干细胞定向分化为内耳毛细胞样细胞，分化获得的内耳毛细胞样细胞具有纤毛毛束结构，表达内耳毛细胞特异蛋白，具有毛细胞电生理功能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119101725A
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202411205876.X
申请日：2024-08-30
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6883 , C12Q1/6874 , C12N15/11 , C40B50/06
Abstract: 本发明提供一种人线粒体基因拷贝数文库的构建方法及应用。利用核基因拷贝数稳定的特点，选取10个具有稳定拷贝数的核内参基因组，基于多因素算法采用“叠瓦式”的探针设计方案，对核内参基因和线粒体全基因组进行探针设计，设计出包含1375条核内参基因序列和498条线粒体基因序列特异性探针；进行酶切随机打断、模板扩增、目标区域捕获，利用不同样本进行生物素标记的线粒体通用接头的特异性序列，形成生物素标记线粒体基因拷贝数探针文库。本发明实现了利用高通量技术检测线粒体基因拷贝数及变异文库构建的方法，使其检测更快速、经济、简便，便于推广和应用，适用于线粒体拷贝数异常导致相关疾病人群的大规模筛查和预防性检查。
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公开(公告)号：CN119464390A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411670375.9
申请日：2024-11-21
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/87 , C12N5/10 , C12N15/10 , C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , G01N33/68 , G01N33/58 , C12Q1/02
Abstract: 本发明提供一种构建转线粒体人脐静脉内皮细胞模型的方法，通过使用含有罗丹明6G的抑制培养基培养人脐静脉内皮细胞，抑制其线粒体DNA复制。然后将线粒体DNA缺失的人脐静脉内皮细胞与携带致病突变或正常对照的供体线粒体(永生化淋巴细胞来源)融合，从而获得携带线粒体DNA突变的转线粒体人脐静脉内皮细胞模型。本发明所述方法可操作性强，批次间重复性高，便于分析疾病表现。通过本发明所述方法构建的携带致病突变的转线粒体人脐静脉内皮细胞为研究血管内皮损伤相关的母系遗传性疾病提供了良好的模型。在血管内皮损伤相关的线粒体疾病病理机制研究，治疗方法探索，药物靶点发现等方面均具有重要的研究和应用价值。
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公开(公告)号：CN119899897A
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202510301828.9
申请日：2025-03-14
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6883 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种人线粒体基因组甲基化的检测方法及应用。针对线粒体DNA双链CG位点进行双态设计，避开重复序列，确保捕获效率，依据探针序列热力学稳定性调整探针剂量；构建线粒体基因组重亚硫酸盐文库，基于热力学稳定性进行叠瓦式设计，根据捕获效率、均一性和覆盖率的需求，选择高GC区域和串联重复区域加密探针和选择侧翼探针的策略；本发明实现了利用高通量技术进行线粒体基因甲基化的检测方法，使其转化效率稳定、捕获效率高、均一性高、甲基化检出率稳定和成本降低，适用于线粒体甲基化标志物和调控机制研究，以及临床应用如疾病诊断、治疗响应和疾病预后等研究。
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公开(公告)号：CN112961833B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202110251570.8
申请日：2021-03-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种将永生化淋巴细胞系重编程为诱导多能干细胞的方法。该重编程方法主要为向永生化淋巴细胞中通过核转法导入表达外源重编程因子的附加体质粒，重编程因子包括OCT3/4、shP53、SOX2、KLF4、LIN28及L‑MYC。本发明能够高效地将永生化淋巴细胞系重编程为iPSC，附加体质粒不会整合进宿主细胞基因组，同时会随细胞增殖而逐渐丢失，从而能够适时沉默外源表达，降低细胞致瘤风险。本发明获得的iPSC具有典型的干细胞形态和与ESC相似的特性，表达细胞干性基因，有分化为外胚层、中胚层、内胚层组织的分化潜能。本发明重编程效率高，且致瘤性低，拓展了永生化淋巴细胞系的临床研究价值，具有应用前景。
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公开(公告)号：CN112961833A
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN202110251570.8
申请日：2021-03-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种将永生化淋巴细胞系重编程为诱导多能干细胞的方法。该重编程方法主要为向永生化淋巴细胞中通过核转法导入表达外源重编程因子的附加体质粒，重编程因子包括OCT3/4、shP53、SOX2、KLF4、LIN28及L‑MYC。本发明能够高效地将永生化淋巴细胞系重编程为iPSC，附加体质粒不会整合进宿主细胞基因组，同时会随细胞增殖而逐渐丢失，从而能够适时沉默外源表达，降低细胞致瘤风险。本发明获得的iPSC具有典型的干细胞形态和与ESC相似的特性，表达细胞干性基因，有分化为外胚层、中胚层、内胚层组织的分化潜能。本发明重编程效率高，且致瘤性低，拓展了永生化淋巴细胞系的临床研究价值，具有应用前景。
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