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公开(公告)号：CN114990040A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210640982.5
申请日：2022-06-07
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种减毒单增李斯特菌的构建策略及应用，所述李斯特菌是以单増李斯特菌野生株为背景，缺失hly基因，第211‑215位氨基酸而得，最终所得减毒株命名为LAPAD1115，其保藏编号为CGMCCNO：24070，保藏机构为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；本发明的单増李斯特菌的减毒株可用于活疫苗治疗载体或免疫佐剂；将hly基因第211‑215位缺失使该细菌毒力大大降低，达到安全级别，但仍保留了较为完整的免疫原性，由于是在李斯特菌基因组上进行缺失修饰，菌内不含抗性质粒，符合生物安全，同时不会由于质粒的丢失而影响李斯特菌自身的生长。
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公开(公告)号：CN120006004A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510150090.0
申请日：2025-02-11
Applicant: 浙江农林大学 , 浙江领与生物科技有限责任公司
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种松材线虫的快速检测试剂盒及其方法和应用，所述检测试剂盒包括预混引物探针的荧光RAA干粉试剂，本发明针对基于RAA快速检测松材线虫的引物探针进行设计筛选，得到了特异性扩增松材线虫ITS基因的引物、探针组，与拟松材线虫无交叉反应；同时，试剂盒包括快速提取松材线虫悬液DNA的裂解液，所述裂解液含有季铵盐、异丙醇和DMSO，显著提高了DNA提取的质量和效率。本发明提供的松材线虫检测试剂盒检测特异性强、灵敏度高，操作简单、便携，在野外条件下，30min内快速实现对松材线虫检测。
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公开(公告)号：CN114250244A
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202111529548.1
申请日：2021-12-14
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供一种以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法，涉及基因工程领域，是以减毒单増李斯特菌背景菌株Lemo‑C07为背景载体，利用PCR技术扩增Lemo‑C07的hly基因498bp以及hly基因下游500bp分别作为片段A和片段B；利用SOE‑PCR技术将三个片段(抗原片段AH1设计在引物上)连在一起获得A‑B的目的片段，如序列SEQ ID NO.1所示；以KpnⅠ和PstⅠ为酶切位点，经酶切、酶连至李斯特菌穿梭质粒pKSV7，获得重组质粒pSL1885，并经质粒电转、同源重组和质粒丢失，获得重组减毒单増李斯特菌载体疫苗。将肿瘤特异性抗原基因整合至减毒李斯特菌基因组中，使抗原基因能够稳定表达，不易丢失；使用的减毒株Lemo‑C07与野生株相比，毒力降低了近10000倍；不含抗性质粒，无抗生素耐药风险，安全性更高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115927753A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211251397.2
申请日：2022-10-13
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6813 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒。该试剂盒包括：预扩增引物混合液，所含预扩增引物的序列如SEQ ID NO：1～14所示；探针混合液，包括左侧探针和右侧探针，序列如SEQ ID NO：15～28所示；MLPA缓冲液；连接缓冲液A；连接缓冲液B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，其包括如序列SEQ ID NO：29和30所示的通用引物；SALSA聚合酶；阴性对照；阳性对照。本发明具备高通量、特异性好、灵敏度高的特点；操作更简便，检测时间更短。
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公开(公告)号：CN108929864B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN201810794416.3
申请日：2018-07-19
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种致弱的鸡传染性法氏囊病病毒，其保藏名称：传染性法氏囊病病毒IBDV/1F，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学，保藏编号：CCTCC NO：V201834，保藏日期：2018年7月3日。本发明还同时提供了上述致弱的鸡传染性法氏囊病病毒的用途：用于制备疫苗，该病毒株不引起鸡的法氏囊损伤，又可以诱导产生高滴度的针对鸡传染性法氏囊病病毒的抗体；该疫苗能抵御强毒株的攻击，且对鸡只的发育没有影响。
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公开(公告)号：CN108929864A
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201810794416.3
申请日：2018-07-19
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种致弱的传染性法氏囊病病毒，其保藏名称：传染性法氏囊病病毒IBDV/1F，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学，保藏编号：CCTCC NO：V201834，保藏日期：2018年7月3日。本发明还同时提供了上述致弱的传染性法氏囊病病毒的用途：用于制备疫苗，该病毒株不引起鸡的法氏囊损伤，又可以诱导产生高滴度的针对鸡传染性法氏囊病病毒的抗体；该疫苗能抵御强毒株的攻击，且对鸡只的发育没有影响。
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公开(公告)号：CN119639813A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411707334.2
申请日：2024-11-27
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域。本发明提供了表达人乳头瘤病毒16和18型E7细胞模型构建方法，其包括如下步骤：在接种有TC‑1细胞的培养基中，将外源质粒转染入TC‑1细胞中；所述培养基中含有G418遗传霉素；所述外源质粒可以稳转HPV18E7。本发明成功构建TC‑1‑HPV18E7细胞模型和小鼠模型，证实重组菌株疫苗LM‑HPV18E7在小鼠模型应用试验中表现出良好的治疗效果。TC‑1‑HPV18E7细胞模型将会使以TC‑1为基础的细胞模型用途将得到扩展，为后续二价甚至多价治疗性疫苗的研发奠定基础。
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公开(公告)号：CN114196605A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111345254.3
申请日：2021-11-15
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，旨在提供一种基于新毒力基因改造的减毒单增李斯特菌构建方法及应用。该减毒单核细胞增多性李斯特菌是以单増李斯特菌野生株为背景，经敲除毒力相关基因Lmo0734后获得。本发明提供了含有该减毒单核细胞增多性李斯特菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明的单増李斯特菌的减毒株可用于活疫苗治疗载体或免疫佐剂；将Lmo0734基因从基因簇中敲除使该细菌毒力大大降低，在达到规定安全级别的同时，仍保留了非常好的免疫原性。由于是在李斯特菌基因组上对毒力相关基因进行改造，不含抗性质粒等生物标记，符合生物安全性。
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