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公开(公告)号：CN119570744A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411649393.9
申请日：2024-11-19
Applicant: 浙江农林大学 , 宁波科瑞特动物药业有限公司
Abstract: 本发明涉及病毒疫苗制备技术，旨在提供一种促进猪肠道冠状病毒增殖培养基的制备及其应用。该培养基是S期阻滞培养基，除细胞生长所需的营养物质和水之外，还包含浓度范围在0.5～8mM之间的胸苷。本发明的细胞培养基具有通用性，将其分别用于PEDV和PDCoV的培养时，都能通过诱导宿主细胞发生S期阻滞而显著增强病毒复制；该培养基能够显著增高PEDV和PDCoV在体外细胞中的病毒滴度，提高病毒疫苗的生产效率；还可以进一步适用于其他能够将宿主细胞阻滞于S期的病毒，从而具备更加拓展的应用前景。
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公开(公告)号：CN118452205A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410487476.6
申请日：2024-04-23
Applicant: 浙江农林大学 , 青岛桥成消毒净化工程有限公司
Abstract: 本发明提供一种复合过氧化物消毒液及其制备方法，包括过氧化氢、过氧甲酸、过氧乙酸和过氧丙酸，工艺包括如下步骤：（1）将甲酸、乙酸、丙酸、过氧化氢和浓硫酸按比例混合，25℃环境下静置得复合过氧化物溶液；（2）取步骤（1）的复合过氧化物溶液进行稀释，加入分散剂、稳定剂搅拌，再加入过氧化氢溶液和水，常温下搅拌均匀。本发明制备的复合过氧化物消毒液具有杀菌效果好，杀菌谱广，稳定性高，耐储存，消毒作用时间延长，分解物质无害的有益效果。
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公开(公告)号：CN116622549A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310344479.X
申请日：2023-04-03
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及微生物领域，旨在提供一种具有抑菌能力的朱鹮源植物乳杆菌及应用方法。该植物乳杆菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏名称为植物乳杆菌LpZJ2101，拉丁名Lactobacillus plantarum，保藏编号为CGMCC NO.26228。该植物乳杆菌具有一定抗酸、抗胆盐能力与抑菌作用；经纯化处理后的菌体能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌等肠道病原菌生长；能够作为常规饲料添加剂用于调节动物胃肠道环境、促进动物健康生长；能够制成发酵液或冻干粉，方便保存、运输和使用，适于产业推广。
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公开(公告)号：CN114250244A
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202111529548.1
申请日：2021-12-14
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供一种以重组减毒单増李斯特菌为载体的结肠癌疫苗及制备方法，涉及基因工程领域，是以减毒单増李斯特菌背景菌株Lemo‑C07为背景载体，利用PCR技术扩增Lemo‑C07的hly基因498bp以及hly基因下游500bp分别作为片段A和片段B；利用SOE‑PCR技术将三个片段(抗原片段AH1设计在引物上)连在一起获得A‑B的目的片段，如序列SEQ ID NO.1所示；以KpnⅠ和PstⅠ为酶切位点，经酶切、酶连至李斯特菌穿梭质粒pKSV7，获得重组质粒pSL1885，并经质粒电转、同源重组和质粒丢失，获得重组减毒单増李斯特菌载体疫苗。将肿瘤特异性抗原基因整合至减毒李斯特菌基因组中，使抗原基因能够稳定表达，不易丢失；使用的减毒株Lemo‑C07与野生株相比，毒力降低了近10000倍；不含抗性质粒，无抗生素耐药风险，安全性更高。
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公开(公告)号：CN114181881A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111534663.8
申请日：2021-12-15
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，旨在提供一种基于氨基酸改造的新型减毒单增李斯特菌构建方法及应用。该减毒单核细胞增多性李斯特菌是以单増李斯特菌野生株为背景，经敲除hly基因中第251‑255位氨基酸后获得。本发明提供了含有该减毒单核细胞增多性李斯特菌的减毒菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明的单増李斯特菌的减毒株可作为外源抗原递送活载体用于肿瘤等疾病的免疫治疗或免疫佐剂。由于是在李斯特菌基因组上进行敲除修饰，不含抗性质粒等生物标记，符合生物安全，且不影响李斯特菌体外生长。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111269868A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010077820.6
申请日：2020-02-01
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，旨在提供一种减毒单核细胞增多性李斯特菌的构建方法和用途。是以单増李斯特菌野生株EGD-e菌株为构建亲本，将hly基因的第478位天冬酰胺和第479位缬氨酸分别突变为丙氨酸，且不含质粒；最终所得减毒株命名为Lemo-C07，其保藏编号为：CGMCC 18647，保藏机构为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明的单増李斯特菌的减毒株可用于活疫苗治疗载体或免疫佐剂；通过氨基酸定点突变单增李斯特菌毒力基因hly的关键位点N478和V479后使该细菌毒力大大降低(达到安全级别)，但仍保留了非常好的免疫原性。由于是在李斯特菌基因组上进行直接突变，菌内不含抗性质粒，符合生物安全，并且不会由于质粒的丢失而影响李斯特菌的生长。
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公开(公告)号：CN109097499A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201811091219.1
申请日：2018-09-19
Applicant: 浙江农林大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种用于检测PEDV-TGEV核酸的双重荧光定量RT-PCR检测试剂盒。(1)反转录和荧光定量RT-PCR扩增混合液：该混合液包含反转录和荧光定量扩增引物以及探针，其序列如SEQ ID NO：1～6所示；其中，反转录引物为12碱基随机引物；(2)阴性对照；(3)阳性对照，包含猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒的阳性对照质粒。与现有方法比较，本发明具有高通量、节省费用、特异性好、灵敏度高的优点。
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公开(公告)号：CN107034236A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710356084.6
申请日：2017-05-19
Applicant: 浙江农林大学
IPC: C12N15/866 , C12N15/50 , C07K14/165
CPC classification number: C12N15/86 , C07K14/005 , C12N2710/14043 , C12N2770/20022 , C12N2800/22
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，旨在提供一种利用杆状病毒表达系统制备猪流行腹泻病毒S1蛋白的方法。包括以下步骤：PEDV的S1基因克隆和密码子的优化；构建PEDV‑S1基因重组杆状病毒表达载体；表达重组PEDV‑S1蛋白的杆状病毒包装和传代；优化表达重组PEDV‑S1蛋白的病毒在sf9细胞表达条件；纯化重组PEDV‑S1蛋白。本发明安全性较高，不存在PEDV弱毒返强的风险；具有天然构象，具有较好的模拟PEDV病毒的免疫原作用；高滴度的免疫原，方便注射或者口服给药。
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公开(公告)号：CN119685202A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411758760.9
申请日：2024-12-03
Applicant: 宁波科瑞特动物药业有限公司 , 浙江农林大学
IPC: C12N1/20 , A61K35/741 , A61P31/14 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一株具有抗猪流行性腹泻病毒活性的单形拟杆菌及其应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏名称为单形拟杆菌ZJNB01，拉丁文名为Bacteroides uniformis，保藏编号为CCTCC NO：M 20241757。本发明所述猪源单形拟杆菌具有显著的益生特性；由于生长迅速，具有较强的抗猪流行性腹泻病毒能力。本发明所述单形拟杆菌和/或其代谢产物，可作为药物活性中心用于制作药物剂，在预防和治疗猪流行性腹泻病毒方面具有广阔的应用场景。
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公开(公告)号：CN119639813A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411707334.2
申请日：2024-11-27
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域。本发明提供了表达人乳头瘤病毒16和18型E7细胞模型构建方法，其包括如下步骤：在接种有TC‑1细胞的培养基中，将外源质粒转染入TC‑1细胞中；所述培养基中含有G418遗传霉素；所述外源质粒可以稳转HPV18E7。本发明成功构建TC‑1‑HPV18E7细胞模型和小鼠模型，证实重组菌株疫苗LM‑HPV18E7在小鼠模型应用试验中表现出良好的治疗效果。TC‑1‑HPV18E7细胞模型将会使以TC‑1为基础的细胞模型用途将得到扩展，为后续二价甚至多价治疗性疫苗的研发奠定基础。
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