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公开(公告)号：CN115873897A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202211207981.8
申请日：2022-09-30
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的欧洲越橘转基因体系的建立方法，该方法包括：取欧洲越橘茎叶作为外植体，诱导其长出一层薄薄的愈伤组织；将该带有一层薄薄愈伤组织的外植体材料放入加有生长素IBA、细胞分裂素ZT和乙酰丁香酮的农杆菌侵染液中进行侵染培养，侵染培养过程中对材料进行超声破碎和真空渗透等处理，促进农杆菌质粒进入植物材料；然后将侵染后的外植体材料进行共培养后再将转基因材料移至筛选培养基中进行筛选，最终获得表现出报告基因(甜菜素合成基因)所呈现的洋红色(玫红色)欧洲越橘愈伤组织。本发明采用特定的愈伤诱导培养基、农杆菌侵染处理、共培养培养基、共培养时间、抗性愈伤组织筛选培养基等进行根癌农杆菌介导的欧洲越橘愈伤组织转基因体系的构建，得到了转基因成功的玫红色愈伤组织，并且转化率也提高至4％。
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公开(公告)号：CN108703069A
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201810385101.3
申请日：2018-04-26
Applicant: 浙江农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种木麻黄愈伤组织再生体系的建立方法，该方法包括：以木麻黄实生苗的幼嫩枝条为外植体，接至培养基上得到膨大的茎段；培养基为：1/2MS+3％蔗糖+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L NAA，pH5.7±0.1；取膨大的茎段，移至愈伤组织诱导培养基上得到愈伤组织；愈伤组织诱导培养基为：1/2MS+3％蔗糖+0.5mg/L 6‑BA+0.1mg/L TDZ，pH5.7±0.1；诱导愈伤组织得到不定芽和生根，得到木麻黄再生苗。本发明针对木麻黄将愈伤组织诱导培养分成两步，先采用特定的膨大诱导培养基培养获得膨大的茎段，再采用特定的愈伤组织诱导培养基得到愈伤组织，不仅能够获得转化率高的再生体系，而且能够明显缩短再生体系获得的周期。
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公开(公告)号：CN118140803A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410268208.5
申请日：2024-03-09
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种蜡叶越橘与乌饭树杂交种子萌发体系的建立方法，该方法包括：选取长势良好的蜡叶越橘和乌饭树为实验材料进行人工杂交授粉，待果实成熟，对果实外表皮进行无菌消毒，取出种子接种至诱导萌发的培养基中培养，种子萌发；培养基配方为：WPM+2%蔗糖+0.9%琼脂+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L CPPU+10 mg/L GA,pH=5.2±0.02；幼苗长到2‑3 cm，移到生根培养基上诱导生根。生根培养基配方为MS+1%蔗糖+1%琼脂，pH=5.8±0.05，得到蜡叶越橘和乌饭树杂交苗。本发明从外植体到获得土壤栽培苗只需要2‑3个月时间，为丰富越橘属不同科的树种杂交育种提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN112375763B
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202011211307.8
申请日：2020-11-03
Applicant: 浙江农林大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了EBS1基因在增强拟南芥抗碳酸氢盐胁迫能力中的应用，该EBS1基因的蛋白编码区的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明鉴定并筛选到一种抗碳酸氢盐胁迫的基因EBS1，提供了EBS1作为正向调控因子在调控拟南芥碳酸氢盐抗性和改善盐碱地种植的新用途，为培育耐碳酸氢盐植株提供依据。
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公开(公告)号：CN118931953B
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202411425904.9
申请日：2024-10-14
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供了一种农杆菌介导的常绿蓝莓转基因体系的建立方法，包括：将含有功能基因的发根农杆菌加入至液体培养基中，制备得到侵染液；真空渗透处理的方法为：将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；以无菌条件下生长的常绿蓝莓苗的嫩芽作为外植体，将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；再将共培养后的外植体洗菌后，放置于再生培养基上进行再生培养；再生培养15d~20d后，外植体陆续长出转基因愈伤组织，并出现芽点，最终得到常绿蓝莓转基因体系。本发明首次实现了常绿蓝莓愈伤组织的转基因，并获得了转基因芽，转化率达3.27%，仅需要2‑3个月就能获得转基因芽。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114711140B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202111388155.3
申请日：2021-11-22
Applicant: 浙江农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种欧洲越橘愈伤组织再生体系的建立方法，该方法包括：以在无菌培养条件下生长良好的欧洲越橘苗的幼嫩枝条为外植体材料，接种至培养基中得到有愈伤的外植体，继续培养，生成不定芽；培养基配方为：WPM+3%蔗糖+1%琼脂+0.5 mg/L IBA+2.0 mg/L ZT,pH=5.2±0.02；不定芽长到2‑3 cm，移到生根培养基上诱导生根。生根培养基配方为WPM+2%蔗糖+1%琼脂+0.3 mg/L IAA+1.0 mg/L KT+0.50 g/L活性炭，pH=5.2±0.02，得到欧洲越橘再生苗。本发明针对欧洲越橘，愈伤组织和不定芽的获得率分别为100%和95%以上。本方法从外植体到获得土壤栽培苗只需要2‑3个月时间，也为欧洲越橘的无性系繁殖提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN114711140A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202111388155.3
申请日：2021-11-22
Applicant: 浙江农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种欧洲越橘愈伤组织再生体系的建立方法，该方法包括：以在无菌培养条件下生长良好的欧洲越橘苗的幼嫩枝条为外植体材料，接种至培养基中得到有愈伤的外植体，继续培养，生成不定芽；培养基配方为：WPM+3%蔗糖+1%琼脂+0.5 mg/L IBA+2.0 mg/L ZT,pH=5.2±0.02；不定芽长到2‑3 cm，移到生根培养基上诱导生根。生根培养基配方为WPM+2%蔗糖+1%琼脂+0.3 mg/L IAA+1.0 mg/L KT+0.50 g/L活性炭，pH=5.2±0.02，得到欧洲越橘再生苗。本发明针对欧洲越橘，愈伤组织和不定芽的获得率分别为100%和95%以上。本方法从外植体到获得土壤栽培苗只需要2‑3个月时间，也为欧洲越橘的无性系繁殖提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN119302226A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411854305.9
申请日：2024-12-17
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种蓝莓辐射诱变育种方法。所述方法包括如下步骤：1）60Co‑γ射线对生长于培养基A中的组培苗进行辐射处理，得到外植体材料；其中，所述辐射处理的强度为0.5～1.5 Gy/min，辐射处理的剂量为80～120 Gy；2）将所述外植体材料接种于培养基B中进行第一次光照培养，以诱导不定芽的产生；3）将步骤2）的培养物接种于培养基A中进行第二次光照培养，得到再生幼苗；4）将所述再生幼苗移栽至培养基C中进行第三次光照培养，得到蓝莓植株。本发明针对蓝莓运用辐射诱变，在3～4个月的时间内获得大量经过辐射的蓝莓植株，为蓝莓的育种与改良提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN118931953A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411425904.9
申请日：2024-10-14
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供了一种农杆菌介导的常绿蓝莓转基因体系的建立方法，包括：将含有功能基因的发根农杆菌加入至液体培养基中，制备得到侵染液；真空渗透处理的方法为：将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；以无菌条件下生长的常绿蓝莓苗的嫩芽作为外植体，将外植体放入侵染液中进行真空渗透处理后，置于共培养培养基上进行共培养；再将共培养后的外植体洗菌后，放置于再生培养基上进行再生培养；再生培养15d~20d后，外植体陆续长出转基因愈伤组织，并出现芽点，最终得到常绿蓝莓转基因体系。本发明首次实现了常绿蓝莓愈伤组织的转基因，并获得了转基因芽，转化率达3.27%，仅需要2‑3个月就能获得转基因芽。
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公开(公告)号：CN116497059A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202310457255.X
申请日：2023-04-26
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种笃斯越橘转基因体系的建立方法，该方法包括：以笃斯越橘无菌幼嫩茎叶为外植体，接种到预培养基中培养10‑14d；得到生长状况良好的愈伤组织后，以此为侵染材料进行侵染，农杆菌侵染后共培养8天，经过潮霉素筛选后培养40‑60d后出现火龙果红色愈伤组织，出现转基因愈伤组织后，调整IBA与Cppu的激素比例，加速出芽，转基因不定芽长到2‑3cm，移到生根培养基上诱导生根。本发明针对笃斯越橘，转化率达4.65％，为笃斯越橘的转基因繁殖提供了技术支持。
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