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公开(公告)号：CN113088535B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202110510243.X
申请日：2021-05-11
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的木麻黄转化体系的建立方法，该方法包括：取发根农杆菌K599的菌液加入至侵染液中，得到农杆菌侵染液；将子叶期的木麻黄实生幼苗作为侵染材料，用刀片轻轻划伤根茎交界处，再将幼苗浸泡在农杆菌侵染液中；侵染后的幼苗重新种回培养基质中，得到带有毛状根生长的木麻黄植株；剪去幼苗的原根，再将木麻黄植株种回培养基中，得到发根农杆菌介导的木麻黄转化植株。本发明通过采用特定的发根农杆菌K599侵染根茎交界处被轻轻划伤的子叶期木麻黄实生幼苗，成功建立了发根农杆菌介导的木麻黄转化体系，不仅克服了周期相对较长、转基因效率相对低等方面的问题，而且建立的木麻黄转化体系的转化成功率较高。
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公开(公告)号：CN113265421B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202110511153.2
申请日：2021-05-11
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的短枝木麻黄愈伤转基因体系的建立方法，该方法包括：取短枝木麻黄枝条作为外植体，诱导愈伤得愈伤组织；挑选愈伤组织放入农杆菌侵染液中进行侵染培养；将侵染后的愈伤组织进行共培养，再进行筛选培养；将呈淡黄色、形态饱满、明显膨大的抗性愈伤组织进行不定芽筛选培养和生根培养；最后，通过GUS染色法判断所述短枝木麻黄再生苗是否为转基因阳性植株，得到短枝木麻黄转基因植株。本发明采用特定的愈伤诱导培养基、共培养培养基、抗性愈伤筛选培养基和不定芽筛选培养基进行农杆菌介导的短枝木麻黄愈伤转基因体系的构建，不仅能够获得短枝木麻黄的转基因植株，而且能够大大缩短转化体系的时间，并提高转化率。
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公开(公告)号：CN113265421A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110511153.2
申请日：2021-05-11
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的短枝木麻黄愈伤转基因体系的建立方法，该方法包括：取短枝木麻黄枝条作为外植体，诱导愈伤得愈伤组织；挑选愈伤组织放入农杆菌侵染液中进行侵染培养；将侵染后的愈伤组织进行共培养，再进行筛选培养；将呈淡黄色、形态饱满、明显膨大的抗性愈伤组织进行不定芽筛选培养和生根培养；最后，通过GUS染色法判断所述短枝木麻黄再生苗是否为转基因阳性植株，得到短枝木麻黄转基因植株。本发明采用特定的愈伤诱导培养基、共培养培养基、抗性愈伤筛选培养基和不定芽筛选培养基进行农杆菌介导的短枝木麻黄愈伤转基因体系的构建，不仅能够获得短枝木麻黄的转基因植株，而且能够大大缩短转化体系的时间，并提高转化率。
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公开(公告)号：CN113088535A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110510243.X
申请日：2021-05-11
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的木麻黄转化体系的建立方法，该方法包括：取发根农杆菌K599的菌液加入至侵染液中，得到农杆菌侵染液；将子叶期的木麻黄实生幼苗作为侵染材料，用刀片轻轻划伤根茎交界处，再将幼苗浸泡在农杆菌侵染液中；侵染后的幼苗重新种回培养基质中，得到带有毛状根生长的木麻黄植株；剪去幼苗的原根，再将木麻黄植株种回培养基中，得到发根农杆菌介导的木麻黄转化植株。本发明通过采用特定的发根农杆菌K599侵染根茎交界处被轻轻划伤的子叶期木麻黄实生幼苗，成功建立了发根农杆菌介导的木麻黄转化体系，不仅克服了周期相对较长、转基因效率相对低等方面的问题，而且建立的木麻黄转化体系的转化成功率较高。
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