公开(公告)号：CN118581075A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410834545.6

申请日：2024-06-26

Applicant: 河北科技大学

Inventor： 张春晓 ,  荀明强 ,  王丽丽 ,  周晓雷 ,  冉凯旋 ,  武天宁 ,  李静 ,  林凯欣

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/75 ,  C12N15/61 ,  C12N1/21 ,  C12P19/24 ,  C12P19/02 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体、其相关生物材料、制备方法及其应用。本发明通过理性分子进化，提供了一种安全菌株来源、耐高温、转化率高的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。该酶最适pH为6.0，最适温度为65℃，70℃下半衰期为30min，在pH7.0、65℃条件下果糖转化率达30.6％，较野生型酶果糖转化率的增长率为12.9％。本发明还提供了该酶的编码基因、表达载体、工程菌株及其制备方法，为其工业化生产奠定基础。本发明可应用于阿洛酮糖异构酶或D‑阿洛酮糖的制备，制备所得的D‑阿洛酮糖可用于食品、保健和医疗等领域。

公开(公告)号：CN118497170B

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202410855344.4

申请日：2024-06-28

Applicant: 河北科技大学

Inventor： 张春晓 ,  冉凯旋 ,  李静 ,  林凯欣

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/75 ,  C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种热稳定性提高的嗜热网球菌β‑甘露聚糖酶突变体及应用，通过随机诱变获得一个热稳定性提高的突变体并将其在枯草芽孢杆菌中表达。结果表明，β‑甘露聚糖酶突变体的最适温度80℃，最适pH 5.0，摇瓶发酵4天，以魔芋胶为底物，较野生型酶活力提高4.1%；其在80℃半衰期为5 h，较野生型增加2 h，酶完全失活时间高于48 h。此外，该β‑甘露聚糖酶突变体水解槐豆胶和瓜尔胶能力较野生型分别提高10.2%和2.0%。该酶在石油开采、动物养殖等领域中展现了良好的应用前景。

公开(公告)号：CN118497170A

公开(公告)日：2024-08-16

申请号：CN202410855344.4

申请日：2024-06-28

Applicant: 河北科技大学

Inventor： 张春晓 ,  冉凯旋 ,  李静 ,  林凯欣

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/75 ,  C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种热稳定性提高的嗜热网球菌β‑甘露聚糖酶突变体及应用，通过随机诱变获得一个热稳定性提高的突变体ManA(Q351Y)，并将其在枯草芽孢杆菌中表达。结果表明，β‑甘露聚糖酶突变体的最适温度80℃，最适pH 5.0，摇瓶发酵4天，以魔芋胶为底物，突变体酶活力达5234.3±87.3 U/mL，较野生型酶活力提高4.1%；突变体80℃半衰期为5 h，较野生型80℃半衰期增加2 h，酶完全失活时间高于48 h。突变体在80℃、pH5.0~6.5范围内孵育60 min，剩余酶活力均超过84.8%。ManA(Q351Y)最适底物为魔芋胶，此外，其水解槐豆胶和瓜尔胶能力较野生型酶分别提高10.2%和2.0%。该酶在石油开采、动物养殖、食品加工等领域中展现了良好的应用前景。