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公开(公告)号:CN104099408A
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201310128374.7
申请日:2013-04-15
Applicant: 河北农业大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了马铃薯疮痂病菌致病菌的快速定性分子检测方法,以我国发现的具有代表性的致病菌株CPS-1(S.scabies)、CPS-2(S.galilaeus)、CPS-3(S.acidiscabies)、SHXHZ-3(S.turgidiscabies)为模式菌株,根据疮痂病菌特有的毒素合成基因簇序列txtA、txtB、txtC(P450)、txtD(nos)设计引物,筛选疮痂致病链霉菌的通用引物,筛选到的通用引物B1/B2对马铃薯疮痂病致病菌具有特异性。本发明设计的对马铃薯疮痂病致病链霉菌的快速定性检测方法不仅可用于对马铃薯疮痂病菌DNA的检测,还可以直接用于对孢悬液以及马铃薯疮痂病组织和土壤中的马铃薯疮痂病菌的检测,且检测准确,灵敏度高。
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公开(公告)号:CN106032549A
公开(公告)日:2016-10-19
申请号:CN201410747149.6
申请日:2015-03-16
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了马铃薯疮痂病菌的定量分子检测方法,根据NCBI GenBank中已登记的马铃薯疮痂病菌特有的毒素合成基因簇中的txtA、txtB保守基因序列设计荧光定量PCR引物,筛选到符合qPCR条件的引物RTA1/RTA2,经检测,其在各测试菌株中的扩增结果稳定,片段大小符合要求,并且无引物二聚体形成,可以作为qPCR检测引物。分别对4种疮痂病菌测试菌株的孢悬液进行定量并提取DNA,稀释至不同浓度作为模板,利用qPCR技术建立标准曲线。利用建立的标准曲线对土壤样品及病组织样品进行测试,结果表明其可对样品进行定量测定(附图)。
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