公开(公告)号：CN101942426A

公开(公告)日：2011-01-12

申请号：CN201010273316.X

申请日：2010-08-31

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 马峙英 ,  王省芬 ,  吴立柱 ,  周洪妹 ,  李懿义 ,  张桂寅 ,  吴立强 ,  李志坤

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及棉花GbSTK基因及其编码蛋白，其以海岛棉Pima90-53为材料，通过cDNA-AFLP技术筛选得到与抗黄萎病相关的差异片段，然后通过反转录链式聚合酶反应(RT-PCR)和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技术扩增得到棉花黄萎病抗性基因，即丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(GbSTK)基因，通过对该基因及其编码蛋白的功能研究，表明GbSTK基因具有一定的抗黄萎病的作用。

公开(公告)号：CN102816790A

公开(公告)日：2012-12-12

申请号：CN201210323707.7

申请日：2012-09-04

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 马峙英 ,  吴立柱 ,  王省芬 ,  李懿义

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  C12N5/10 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供了一种含有启动子-多克隆位点-终止子序列的植物表达载体，通过PCR反应和限制性内切酶酶切、连接技术将CaMV 35S启动子，质粒载体的多克隆位点和NOS终止子依次克隆并插入到双元载体的多克隆位点，构建成植物表达载体。本发明提供的植物表达载体pCamE可以完整独立的驱动插入基因的表达，在该载体的多克隆位点、启动子上游和终止子下游分别提供了8个、4个和3个，共计15个限制性内切酶酶切位点，可方便使用。pCamE载体具有在大肠杆菌中拷贝数高，在植物宿主材料内能够稳定遗传、表达的特点，且在使用过程中方便、快捷、经济和实用。

公开(公告)号：CN102816790B

公开(公告)日：2014-02-19

申请号：CN201210323707.7

申请日：2012-09-04

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 马峙英 ,  吴立柱 ,  王省芬 ,  李懿义

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/84 ,  C12N5/10 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供了一种含有启动子-多克隆位点-终止子序列的植物表达载体，通过PCR反应和限制性内切酶酶切、连接技术将CaMV 35S启动子，质粒载体的多克隆位点和NOS终止子依次克隆并插入到双元载体的多克隆位点，构建成植物表达载体。本发明提供的植物表达载体pCamE可以完整独立的驱动插入基因的表达，在该载体的多克隆位点、启动子上游和终止子下游分别提供了8个、4个和3个，共计15个限制性内切酶酶切位点，可方便使用。pCamE载体具有在大肠杆菌中拷贝数高，在植物宿主材料内能够稳定遗传、表达的特点，且在使用过程中方便、快捷、经济和实用。

公开(公告)号：CN101942426B

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201010273316.X

申请日：2010-08-31

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 马峙英 ,  王省芬 ,  吴立柱 ,  周洪妹 ,  李懿义 ,  张桂寅 ,  吴立强 ,  李志坤

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及棉花GbSTK基因及其编码蛋白，其以海岛棉Pima90-53为材料，通过cDNA-AFLP技术筛选得到与抗黄萎病相关的差异片段，然后通过反转录链式聚合酶反应(RT-PCR)和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技术扩增得到棉花黄萎病抗性基因，即丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(GbSTK)基因，通过对该基因及其编码蛋白的功能研究，表明GbSTK基因具有一定的抗黄萎病的作用。