公开(公告)号：CN104120169A

公开(公告)日：2014-10-29

申请号：CN201310145528.3

申请日：2013-04-24

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 杨志辉 ,  朱杰华 ,  徐进 ,  齐明星 ,  秦宇轩 ,  桂秀梅 ,  陶晡 ,  许小虎 ,  张福光 ,  杨毅清

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明属于致病疫霉线粒体基因型和异质性的鉴定技术领域。本发明的目的是提供一种基于聚合酶链式反应（PCR）的快速、准确检测致病疫霉线粒体基因型和异质性的试剂盒及检测方法。试剂盒包含PCR扩增所需要的两对专一性引物对和Mix，其中，两对引物对分别为：InDel-F：5'-GTGGGTTCGAGTCCCACTAA-3'，InDel-R：5'-CTCACCCGTTCGCTATGTTT-3'，和RSU-F：5'-ACGGAATTATCGGAAGATTT-3'，RSU-R：5'-AAATCCCTTTTATACTGTAATTTGAT-3'。检测过程如下：提取致病疫霉菌株的基因组DNA；利用两对专一性引物和试剂盒进行PCR扩增；PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测结果；条带的观察与条带模式的命名；线粒体基因型的确定；线粒体异质性的判定。该试剂盒可用于国家动植物检验检疫部门对外来致病疫霉和农业部门对不同区域致病疫霉群体的监测，也可用于各大种薯生产企业对于基地致病疫霉特征确定和动态变化的监测。

公开(公告)号：CN104120169B

公开(公告)日：2016-08-10

申请号：CN201310145528.3

申请日：2013-04-24

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 杨志辉 ,  朱杰华 ,  徐进 ,  齐明星 ,  秦宇轩 ,  桂秀梅 ,  陶晡 ,  许小虎 ,  张福光 ,  杨毅清

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于致病疫霉线粒体基因型和异质性的鉴定技术领域。本发明的目的是提供一种基于聚合酶链式反应（PCR）的快速、准确检测致病疫霉线粒体基因型和异质性的试剂盒及检测方法。试剂盒包含PCR扩增所需要的两对专一性引物对和Mix，其中，两对引物对分别为：InDel?F：5'?GTG GGT TCG AGT CCC ACT AA?3'，InDel?R：5'?CTC ACC CGT TCG CTA TGT TT?3'，和RSU?F：5'?ACG GAA TTA TCG GAA GAT TT?3'，RSU?R：5'?AAA TCC CTT TTA TAC TGT AAT TTG AT?3'。检测过程如下：提取致病疫霉菌株的基因组DNA；利用两对专一性引物和试剂盒进行PCR扩增；PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测结果；条带的观察与条带模式的命名；线粒体基因型的确定；线粒体异质性的判定。该试剂盒可用于国家动植物检验检疫部门对外来致病疫霉和农业部门对不同区域致病疫霉群体的监测，也可用于各大种薯生产企业对于基地致病疫霉特征确定和动态变化的监测。