公开(公告)号：CN102634523B

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201210083746.4

申请日：2012-03-27

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 李亚宁 ,  刘大群 ,  孟庆芳 ,  张立荣 ,  李星 ,  张娜 ,  冀红柳 ,  张汀

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/36 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N15/76 ,  A01N47/44 ,  A01P3/00 ,  C12N15/10 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明涉及玫瑰黄链霉菌（Streptomycesroseoflavus）Men-myco-93-63的nsdBmgh基因、制备方法及其应用。本发明以天蓝色链霉菌A3(2)抗生素代谢途径中重要的负调控基因nsdB的序列自主设计引物Ns8F和Ns8R，扩增玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63基因组DNA，得到了1121bp的片段；随后利用非特异引物锚定PCR（NPA-PCR）方法对该靶序列两端进行延伸，获得玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的nsdBmgh基因。通过基因中断对该基因进行了功能验证，基因阻断突变株比出发菌株代谢产物的抑菌活性明显提高。nsdBmgh基因的制备和应用为进一步研究和探明玫瑰黄链霉菌抗生素合成代谢途径和调控机理提供了又一重要依据，为防治植物病害的抗生素高产基因工程菌株的应用奠定了重要的基础。

公开(公告)号：CN102634523A

公开(公告)日：2012-08-15

申请号：CN201210083746.4

申请日：2012-03-27

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 李亚宁 ,  刘大群 ,  孟庆芳 ,  张立荣 ,  李星 ,  张娜 ,  冀红柳 ,  张汀

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/36 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N15/76 ,  A01N47/44 ,  A01P3/00 ,  C12N15/10 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明涉及玫瑰黄链霉菌（Streptomycesroseoflavus）Men-myco-93-63的nsdBmgh基因、制备方法及其应用。本发明以天蓝色链霉菌A3(2)抗生素代谢途径中重要的负调控基因nsdB的序列自主设计引物Ns8F和Ns8R，扩增玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63基因组DNA，得到了1121bp的片段；随后利用非特异引物锚定PCR（NPA-PCR）方法对该靶序列两端进行延伸，获得玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的nsdBmgh基因。通过基因中断对该基因进行了功能验证，基因阻断突变株比出发菌株代谢产物的抑菌活性明显提高。nsdBmgh基因的制备和应用为进一步研究和探明玫瑰黄链霉菌抗生素合成代谢途径和调控机理提供了又一重要依据，为防治植物病害的抗生素高产基因工程菌株的应用奠定了重要的基础。

公开(公告)号：CN102212533A

公开(公告)日：2011-10-12

申请号：CN201110096226.2

申请日：2011-04-18

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 李亚宁 ,  刘大群 ,  孟庆芳 ,  张立荣 ,  李星 ,  张娜 ,  冀红柳 ,  张汀

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/36 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N15/82 ,  A01N63/02 ,  A01P3/00 ,  C12N15/10 ,  C12R1/465 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及玫瑰黄链霉菌（Streptomycesroseoflavus）Men-myco-93-63的nsdBmgh基因、制备方法及其应用。本发明以天蓝色链霉菌A3(2)抗生素代谢途径中重要的负调控基因nsdB的序列自主设计引物Ns8F和Ns8R，扩增玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63基因组DNA,得到了1121bp的片段；随后利用非特异引物锚定PCR（NPA-PCR）方法对该靶序列两端进行延伸，获得玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63nsdBmgh基因。nsdBmgh基因的制备为进一步研究和探明玫瑰黄链霉菌抗生素合成代谢途径和调控机理提供了又一重要依据，为抗生素高产基因工程菌株的获得奠定了重要基础。