公开(公告)号：CN119162232A

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202411435080.3

申请日：2024-10-15

Applicant: 江西省林业科学院 ,  中国林业科学研究院亚热带林业研究所

Inventor： 刘倩 ,  杨春霞 ,  邓诏磊 ,  符潮 ,  涂忠华 ,  丁伟 ,  周光 ,  韩小娇 ,  廖翔 ,  栾启福 ,  谷振军 ,  杜强

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12N15/29 ,  C12N5/10 ,  C07K14/415

Abstract: 本发明公开了氮磷高效利用基因SPX4在湿地松中的遗传转化方法，涉及林木基因工程技术领域，该方法包括以下步骤：(1)胚性愈伤组织的获得；(2)农杆菌侵染液的制备；(3)遗传转化；(4)抗性愈伤组织的筛选；(5)转基因胚性愈伤组织的鉴定。本发明首次针对湿地松建立了其稳定转化遗传体系，将湿地松胚性愈伤组织重悬后用含有植物双元表达载体PBI121‑GFP‑SPX4的GV3101农杆菌菌液侵染20min，共培养2d，筛选培养获得了具有卡那抗性的愈伤组织，后经PCR检测证实外源SPX4基因已成功转入湿地松基因组DNA中，为湿地松氮磷高效利用良种培育奠定了理论基础。

公开(公告)号：CN116998403A

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202310900687.3

申请日：2023-07-21

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 杨春霞 ,  邓诏磊 ,  胡珊 ,  刘倩 ,  丁伟 ,  周光 ,  谷振军 ,  杜强

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种增强胚性退化的湿地松胚性愈伤组织胚性的方法，属于植物组织培养领域。本发明的增强胚性退化的湿地松胚性愈伤组织胚性的方法，将胚性退化的湿地松胚性愈伤组织接种到增殖培养基中进行增殖培养，获得胚性增强的湿地松愈伤组织。增殖培养基配方优选为mLP基础培养基、蔗糖30g/L、结冷胶4.0g/L、6‑BA 0.5‑1.0mg/L、KT 0.5‑1.0mg/L、NAA 1.0‑2.0mg/L、L‑谷氨酰胺450mg/L、水解酪蛋白500mg/L、肌醇500mg/L、2‑(N‑吗啉)乙磺酸一水物250mg/L、IBA 0.10mg/L。IBA浓度为0.10mg/L时，愈伤组织胚性的恢复效果最佳。

公开(公告)号：CN119422885A

公开(公告)日：2025-02-14

申请号：CN202411635961.X

申请日：2024-11-15

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 杨春霞 ,  邓诏磊 ,  徐琳 ,  刘倩 ,  胡珊 ,  谷振军 ,  杜强

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种高效促进湿地松体胚成熟的方法，涉及植物育种技术领域。该方法将湿地松胚性愈伤组织接种至含有磺肽素和/或活性炭、或PEG8000和/或壳寡糖的体胚成熟培养基中进行体胚诱导培养，可显著促进湿地松体胚提前成熟。本发明结果表明：当在培养基中添加的磺肽素浓度为0.5mg/L时，成熟体胚总数高达109个/皿；当同时添加0.5mg/L磺肽素和1mg/L活性炭时，此时成熟体胚数高达288个/皿；当同时添加120g/L PEG 8000和6mg/L壳寡糖时，成熟体胚数高达123个/皿。综上所述，本发明公开的方法能够高效促进湿地松体胚成熟，体胚诱导效率高，实用性强。

公开(公告)号：CN110012835A

公开(公告)日：2019-07-16

申请号：CN201910296957.8

申请日：2019-04-12

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 程强强 ,  杨春霞 ,  丁伟 ,  谷振军 ,  肖复明 ,  杜强

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明提供了一种湿地松胚性愈伤组织诱导与增殖的方法，包括以下步骤：(1)胚性愈伤组织的诱导培养：将未成熟的湿地松种胚置于胚性愈伤组织诱导培养基(以DCR培养基为基础培养基，并添加蔗糖30g/L、卡拉胶7g/L、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)1.0mg/L-2.0mg/L、N6-呋喃甲基腺嘌呤(KT)1.0mg/L-2.5mg/L、L-谷氨酰胺300mg/L、水解酪蛋白250mg/L-500mg/L、肌醇1g/L、2-(N-吗啉)乙磺酸一水物250mg/L)上进行诱导培养，获得初代胚性愈伤组织。(2)胚性愈伤组织增殖：将步骤(1)获得的胚性愈伤组织转移到增殖培养基(以DCR培养基为基础培养基，并添加麦芽糖30g/L、卡拉胶7g/L、2,4-D0.5mg/L-1.0mg/L、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)0.5mg/L-1.0mg/L、L-谷氨酰胺300mg/L、水解酪蛋白250mg/L-500mg/L)中进行增殖培养，获得增殖胚性愈伤组织。

公开(公告)号：CN116998403B

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202310900687.3

申请日：2023-07-21

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 杨春霞 ,  邓诏磊 ,  胡珊 ,  刘倩 ,  丁伟 ,  周光 ,  谷振军 ,  杜强

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种增强胚性退化的湿地松胚性愈伤组织胚性的方法，属于植物组织培养领域。本发明的增强胚性退化的湿地松胚性愈伤组织胚性的方法，将胚性退化的湿地松胚性愈伤组织接种到增殖培养基中进行增殖培养，获得胚性增强的湿地松愈伤组织。增殖培养基配方优选为mLP基础培养基、蔗糖30g/L、结冷胶4.0g/L、6‑BA 0.5‑1.0mg/L、KT 0.5‑1.0mg/L、NAA 1.0‑2.0mg/L、L‑谷氨酰胺450mg/L、水解酪蛋白500mg/L、肌醇500mg/L、2‑(N‑吗啉)乙磺酸一水物250mg/L、IBA 0.10mg/L。IBA浓度为0.10mg/L时，愈伤组织胚性的恢复效果最佳。

公开(公告)号：CN118440983A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410699489.X

申请日：2024-05-31

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 杨春霞 ,  邓诏磊 ,  刘倩 ,  胡珊 ,  涂忠华 ,  杜强 ,  谷振军 ,  周光 ,  丁伟

IPC: C12N15/82 ,  A01H4/00 ,  A01H7/00

Abstract: 本发明公开了一种基于马尾松胚性愈伤组织的遗传转化方法，属于基因工程技术领域。本发明包括将预培养5～10d的胚性愈伤组织作为遗传转化受体，利用根癌农杆菌介导将目的基因转入胚性愈伤组织中进行遗传转化，在遗传转化后对胚性愈伤组织进行共培养，除菌后经过筛选培养后，获得抗性愈伤组织，转化效率最高可达到每克愈伤组织产生15个抗性系，即15个/g。本发明提供的基于马尾松胚性愈伤组织的遗传转化方法，操作简单、周期短、遗传转化效率高，可为马尾松功能基因验证、分子设计育种及新种质创制等方面研究提供了高效的研究平台。

公开(公告)号：CN111280057B

公开(公告)日：2021-01-19

申请号：CN202010205605.X

申请日：2020-03-20

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 杨春霞 ,  丁伟 ,  谷振军 ,  程强强 ,  杜强 ,  黄宝祥

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种诱导火炬松胚性愈伤组织的方法及其专用培养基，属于植物组织培养技术领域。该方法将未成熟的火炬松种子置于诱导培养基上进行诱导培养，获得生长迅速、活力旺盛的胚性细胞系，其中，诱导培养基以DCR培养基为基础培养基，添加有2，4‑D、6‑BA、NAA、ABA、油菜素内酯、L‑谷氨酰胺、水解酪蛋白、肌醇、2‑(N‑吗啉)乙磺酸一水物。本发明建立了一套稳定、高效的火炬松胚性愈伤组织的诱导方法，提高了胚性愈伤组织的产量和质量，且胚性愈伤组织继代增殖正常，保持了良好的胚性，为进一步开展体胚育苗、遗传转化、种质创新等研究提供了重要的技术支撑。

公开(公告)号：CN111280057A

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN202010205605.X

申请日：2020-03-20

Applicant: 江西省林业科学院

Inventor： 杨春霞 ,  丁伟 ,  谷振军 ,  程强强 ,  杜强 ,  黄宝祥

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种诱导火炬松胚性愈伤组织的方法及其专用培养基，属于植物组织培养技术领域。该方法将未成熟的火炬松种子置于诱导培养基上进行诱导培养，获得生长迅速、活力旺盛的胚性细胞系，其中，诱导培养基以DCR培养基为基础培养基，添加有2，4-D、6-BA、NAA、ABA、油菜素内酯、L-谷氨酰胺、水解酪蛋白、肌醇、2-(N-吗啉)乙磺酸一水物。本发明建立了一套稳定、高效的火炬松胚性愈伤组织的诱导方法，提高了胚性愈伤组织的产量和质量，且胚性愈伤组织继代增殖正常，保持了良好的胚性，为进一步开展体胚育苗、遗传转化、种质创新等研究提供了重要的技术支撑。