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公开(公告)号:CN109085230A
公开(公告)日:2018-12-25
申请号:CN201810853978.0
申请日:2018-07-30
Applicant: 江西农业大学
IPC: G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种鉴定木聚糖酶蛋白条带及活性的酶谱方法,包括以下步骤:步骤(1)制备待测定的木聚糖酶液样品;步骤(2)在垂直电泳槽内制备分离胶,再在分离胶上层上制备具有样品槽的浓缩胶层;步骤(3)在浓缩胶的样品槽中点样后,对垂直电泳槽施加电压,跑胶;步骤(4)利用割胶板将样品所在泳道的胶切成条状,去除浓缩胶,保留分离胶,即获得包含样品的条状分离胶;将包含样品的条状分离胶,放入乙酸钠溶液中,孵育;步骤(5)将孵育后的包含样品的条状分离胶紧密贴在培养皿中的底物胶的胶面上,将培养皿放置在30-50℃的生化培养箱中,培养1-36小时,直至有清晰的条带和透明圈出现。本发明中操作简单,且采用同一块胶,能够同时鉴定出木聚糖酶蛋白条带及活性。
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公开(公告)号:CN105349568A
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201510648245.X
申请日:2015-10-10
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种含有编码Mnp蛋白基因的酵母表达载体,该载体中含有Mnp基因,结合乳酸酵母菌可胞外生产Mnp蛋白。本发明还公开了该含有编码Mnp蛋白基因的酵母表达载体的构建、制备Mnp蛋白和降解油菜秸秆木质素的方法。本发明利用了现代分子技术,将Mnp进行克隆,成功构建了表达载体。利用该载体并结合乳酸酵母菌GG799,可以进行Mnp的胞外分泌和表达,大大缩减了原始菌种的培养时间,提高Mnp的活性,且产生的Mnp可有效降解油菜秸秆的木质素。操作简单,便于香菇Mnp的商业化生产和应用。
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公开(公告)号:CN113367239A
公开(公告)日:2021-09-10
申请号:CN202110761728.6
申请日:2021-07-06
Applicant: 江西农业大学 , 泌阳县夏南牛科技开发有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肉牛育肥饲料,以干物质基础计,包括以下重量份的原料:玉米青贮30.0‑41.0份、麦秸5.0‑7.0份、玉米25.0‑40.0份、芝麻粕16.0‑19.0份、花生粕6.0‑7.0份和预混料2.0‑4.0份;制备方法:(1)将各原料分别进行烘干,并计算各原料的干物质含量;(2)计算并称取各原料;(3)将各原料混合,搅拌均匀,即得;使用方法:(1)选择健康、年龄为1岁的肉牛;(2)肉牛采用栓系式饲养方式,采用移动式撒料车饲喂肉牛育肥饲料,自由采食,自由饮水,每天清理食槽,打扫牛舍。本发明可以使肉牛三个月增重约170kg,日增重达到1.9kg/天,显著缩短了肉牛的出栏时间。
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公开(公告)号:CN109085230B
公开(公告)日:2020-11-24
申请号:CN201810853978.0
申请日:2018-07-30
Applicant: 江西农业大学
IPC: G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种鉴定木聚糖酶蛋白条带及活性的酶谱方法,包括以下步骤:步骤(1)制备待测定的木聚糖酶液样品;步骤(2)在垂直电泳槽内制备分离胶,再在分离胶上层上制备具有样品槽的浓缩胶层;步骤(3)在浓缩胶的样品槽中点样后,对垂直电泳槽施加电压,跑胶;步骤(4)利用割胶板将样品所在泳道的胶切成条状,去除浓缩胶,保留分离胶,即获得包含样品的条状分离胶;将包含样品的条状分离胶,放入乙酸钠溶液中,孵育;步骤(5)将孵育后的包含样品的条状分离胶紧密贴在培养皿中的底物胶的胶面上,将培养皿放置在30‑50℃的生化培养箱中,培养1‑36小时,直至有清晰的条带和透明圈出现。本发明中操作简单,且采用同一块胶,能够同时鉴定出木聚糖酶蛋白条带及活性。
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公开(公告)号:CN110029123A
公开(公告)日:2019-07-19
申请号:CN201910267343.7
申请日:2019-04-03
Applicant: 江西农业大学
IPC: C12N15/81 , C12N15/66 , C12N9/42 , A23K20/189
Abstract: 本发明公开了一种酵母表达载体构建及表达外切型纤维素酶的方法与应用,利用现代分子技术成功优化了编码香菇外切型纤维素酶的基因序列,构建了能够在酵母体外表达外切型纤维素酶的表达载体pPICZαA-Cel7A,利用该载体和毕赤酵母能够制备外切型纤维素酶,进而为外切型纤维素酶在生产中的应用提供技术支撑。通过本发明方法获得的重组毕赤酵母菌酶产率高,活性高,效果佳。
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公开(公告)号:CN112048518B
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202010852694.7
申请日:2020-08-22
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种玉米醇溶蛋白降解酶的制备方法及其应用,属于分子生物学技术领域。本发明公开的一种玉米醇溶蛋白降解酶的制备方法,利用现代分子技术成功优化了玉米醇溶蛋白降解酶的基因序列,构建了能够在酵母体外表达玉米醇溶蛋白降解酶的表达载体pPICZαA‑ZDP,利用该载体和毕赤酵母能够制备玉米醇溶蛋白降解酶,进而为玉米醇溶蛋白降解酶在生产中的应用提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN109022469B
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN201810812611.4
申请日:2018-07-23
Applicant: 江西农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/81 , C12N9/24 , A23K50/10 , A23K20/189
Abstract: 本发明公开了一种酵母表达载体的构建方法,包括以下步骤,以木聚糖酶基因片段构建pMD‑Xyn载体,利用限制性内切酶对pMD‑Xyn载体进行酶切,胶回收木聚糖酶基因片段,利用限制性内切酶酶切pPICZαA载体,将胶回收的木聚糖酶基因片段与酶切后的pPICZαA载体连接,导入大肠杆菌感受态细胞DH5α,转化构建pPICZαA‑Xyn载体。本发明基于香菇菌在发酵秸秆过程中能够产生木聚糖酶有效降解秸秆中木质纤维素的主要成分木聚糖,以其木聚糖酶基因构建了一种含木聚糖酶基因的酵母表达载体,以为木聚糖酶的商业化生产、秸秆类饲料的反刍动物利用方面提供理论基础和技术支撑。
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公开(公告)号:CN109022469A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201810812611.4
申请日:2018-07-23
Applicant: 江西农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/81 , C12N9/24 , A23K50/10 , A23K20/189
CPC classification number: C12N15/66 , A23K20/189 , A23K50/10 , C12N9/248 , C12N15/815
Abstract: 本发明公开了一种酵母表达载体的构建方法,包括以下步骤,以木聚糖酶基因片段构建pMD‑Xyn载体,利用限制性内切酶对pMD‑Xyn载体进行酶切,胶回收木聚糖酶基因片段,利用限制性内切酶酶切pPICZαA载体,将胶回收的木聚糖酶基因片段与酶切后的pPICZαA载体连接,导入大肠杆菌感受态细胞DH5α,转化构建pPICZαA‑Xyn载体。本发明基于香菇菌在发酵秸秆过程中能够产生木聚糖酶有效降解秸秆中木质纤维素的主要成分木聚糖,以其木聚糖酶基因构建了一种含木聚糖酶基因的酵母表达载体,以为木聚糖酶的商业化生产、秸秆类饲料的反刍动物利用方面提供理论基础和技术支撑。
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公开(公告)号:CN112048518A
公开(公告)日:2020-12-08
申请号:CN202010852694.7
申请日:2020-08-22
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种玉米醇溶蛋白降解酶的制备方法及其应用,属于分子生物学技术领域。本发明公开的一种玉米醇溶蛋白降解酶的制备方法,利用现代分子技术成功优化了玉米醇溶蛋白降解酶的基因序列,构建了能够在酵母体外表达玉米醇溶蛋白降解酶的表达载体pPICZαA‑ZDP,利用该载体和毕赤酵母能够制备玉米醇溶蛋白降解酶,进而为玉米醇溶蛋白降解酶在生产中的应用提供技术支撑。
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