一种鉴定木聚糖酶蛋白条带及活性的酶谱方法

    公开(公告)号:CN109085230A

    公开(公告)日:2018-12-25

    申请号:CN201810853978.0

    申请日:2018-07-30

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定木聚糖酶蛋白条带及活性的酶谱方法,包括以下步骤:步骤(1)制备待测定的木聚糖酶液样品;步骤(2)在垂直电泳槽内制备分离胶,再在分离胶上层上制备具有样品槽的浓缩胶层;步骤(3)在浓缩胶的样品槽中点样后,对垂直电泳槽施加电压,跑胶;步骤(4)利用割胶板将样品所在泳道的胶切成条状,去除浓缩胶,保留分离胶,即获得包含样品的条状分离胶;将包含样品的条状分离胶,放入乙酸钠溶液中,孵育;步骤(5)将孵育后的包含样品的条状分离胶紧密贴在培养皿中的底物胶的胶面上,将培养皿放置在30-50℃的生化培养箱中,培养1-36小时,直至有清晰的条带和透明圈出现。本发明中操作简单,且采用同一块胶,能够同时鉴定出木聚糖酶蛋白条带及活性。

    一种酵母表达载体的构建方法及其制备木聚糖酶的方法和应用

    公开(公告)号:CN109022469B

    公开(公告)日:2021-10-15

    申请号:CN201810812611.4

    申请日:2018-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种酵母表达载体的构建方法,包括以下步骤,以木聚糖酶基因片段构建pMD‑Xyn载体,利用限制性内切酶对pMD‑Xyn载体进行酶切,胶回收木聚糖酶基因片段,利用限制性内切酶酶切pPICZαA载体,将胶回收的木聚糖酶基因片段与酶切后的pPICZαA载体连接,导入大肠杆菌感受态细胞DH5α,转化构建pPICZαA‑Xyn载体。本发明基于香菇菌在发酵秸秆过程中能够产生木聚糖酶有效降解秸秆中木质纤维素的主要成分木聚糖,以其木聚糖酶基因构建了一种含木聚糖酶基因的酵母表达载体,以为木聚糖酶的商业化生产、秸秆类饲料的反刍动物利用方面提供理论基础和技术支撑。

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