一种茉莉花VIGS沉默体系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN120060291A

    公开(公告)日:2025-05-30

    申请号:CN202510298888.X

    申请日:2025-03-13

    Abstract: 本发明提供了一种茉莉花VIGS沉默体系及其构建方法和应用,属于植物基因工程技术领域;本发明首先提供了一种沉默茉莉花PDS基因的特异性核苷酸片段,并以烟草脆裂病毒(TRV)为载体,通过同源重组将所述特异性核苷酸片段插入pTRV2载体,构建了沉默载体pTRV2‑JsPDS;本发明将载体pTRV1、载体pTRV2、沉默载体pTRV2‑JsPDS分别转入农杆菌得到茉莉花PDS基因的VIGS沉默体系,采用该沉默体系侵染茉莉花植株,经实验验证,本发明的沉默体系可诱导茉莉花JsPDS基因的沉默,基因沉默后的茉莉花叶片中总叶绿素含量降低34.98%‑63.79%,内源JsPDS基因的相对表达量降低56.38%‑85.79%。本发明具有操作简便、周期短、沉默效率高、且无需完整基因序列信息和遗传转化体系等优点,为茉莉花基因功能研究提供了一种高效、可靠的技术手段。

    一种绣球原生质体制备及瞬时转化的方法

    公开(公告)号:CN112442476A

    公开(公告)日:2021-03-05

    申请号:CN202011359535.X

    申请日:2020-11-27

    Abstract: 本发明涉及一种绣球原生质体制备及瞬时转化的方法,属于细胞生物学技术领域;本发明选择绣球叶片,将叶缘切除,垂直于主叶脉将叶片切条,放入酶解液中酶解;酶解后加入W5溶液终止消化,然后过滤得到绣球原生质体;并将原生质体瞬时转化。本发明利用叶片制备原生质体不受季节限制,操作简单并易于实现;所用到的酶解液配方简单,获得的原生质体产量高、活性强;酶解液中添加KH2PO4,可显著增加原生质体质膜稳定性,有效保持原生质体活力;本发明还针对绣球叶片原生质体建立了相应的瞬时转化方法,操作简便、转化效率高;为绣球基础和应用研究提供平了重要的技术支持,以促进绣球产业发展。

    一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法

    公开(公告)号:CN116584395B

    公开(公告)日:2024-04-02

    申请号:CN202310758803.2

    申请日:2023-06-26

    Abstract: 本发明涉及一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法,其方法包括:取大花绣球与乔木绣球种间杂交授粉30‑45d后膨大的子房清洗消毒,剥取子房中的未成熟杂种胚珠并接种到1/2MS培养基上,暗培养后用1/2MS+2.0mg/L6‑BA+0.1mg/LIBA+50mg/LCW的愈伤组织诱导培养基进行愈伤组织诱导,用1/2WPM+0.3mg/LIBA的增殖与分化培养基进行增殖与分化,用生根培养基生根培养后,炼苗移栽即可,能够提高其种间杂交育种效率,出愈率达70‑80%,分化率达75‑80%,生根率达95‑100%,缩短育种周期,操作方法简单、成本低、成活率高。

    一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法

    公开(公告)号:CN116584395A

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202310758803.2

    申请日:2023-06-26

    Abstract: 本发明涉及一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法,其方法包括:取大花绣球与乔木绣球种间杂交授粉30‑45d后膨大的子房清洗消毒,剥取子房中的未成熟杂种胚珠并接种到1/2MS培养基上,暗培养后用1/2MS+2.0mg/L6‑BA+0.1mg/LIBA+50mg/LCW的愈伤组织诱导培养基进行愈伤组织诱导,用1/2WPM+0.3mg/LIBA的增殖与分化培养基进行增殖与分化,用生根培养基生根培养后,炼苗移栽即可,能够提高其种间杂交育种效率,出愈率达70‑80%,分化率达75‑80%,生根率达95‑100%,缩短育种周期,操作方法简单、成本低、成活率高。

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