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公开(公告)号：CN107267549B
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201710547595.6
申请日：2017-07-06
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
Abstract: 本发明公开了一种中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法，包括：1）以中山杉生长30天长势良好的组培苗幼嫩叶片为材料，对材料进行30h的黑暗预处理；2）对叶肉原生质体进行分离和纯化；3）从15~20mL过夜培养菌液抽提50~80μg质粒，质粒为载体p2FGW7.0；4）PEG介导进行原生质体转化。本发明的中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法，其操作简单易行，除可以获得大量、完整、纯净的中山杉叶肉原生质体外，还可以达到高达80%的质粒转化率。从而解决了无法深入研究中山杉基因功能的难题，也为其他针叶树种原生质体瞬时表达体系建立提供一定的参考及借鉴，将在林木基因工程领域有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN110669718A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910948163.5
申请日：2019-09-30
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
Abstract: 本发明公开了一种落羽杉根，茎，叶原生质体分离、纯化及瞬时高效转化方法，包括以下步骤：1)选择生长出1-3轮叶片的落羽杉幼苗，避光培养24h；先用75％酒精清洗1遍，再用去离子水清洗3遍，然后刀片分离落羽杉幼苗的叶片，茎段以及根部；2)使用纤维素酶和果胶酶将落羽杉根，茎，叶酶解成原生质体，并对所得到的原生质体进行分离、纯化和预处理；3)以不同组织原生质体为受体，利用PEG介导转化法将含有外源基因的瞬时表达载体转入原生质体中，经培养，使外源基因在原生质体中表达。该方法操作简单易行，可以获得大量、完整、纯净的落羽杉根，茎，叶原生质体，并且转化效率均高达50％以上，为落羽杉基因瞬时表达检测，原生质体融合等提供技术依据。
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公开(公告)号：CN107384936B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201710613030.3
申请日：2017-07-25
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种影响中山杉耐淹涝能力的ThRap2.1基因及其应用，所述的ThRap2.1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将ThRap2.1基因转入木本模式植物杨树中，过量表达ThRap2.1的转基因杨树，生长速率变慢，节间明显变短，转基因植株中ThRap2.1表达量较对照杨树高出300‑600倍，且水淹胁迫下，ThRap2.1基因的表达量呈几千倍上升。说明ThRap2.1基因是植物响应水淹胁迫的重要基因，在林木基因工程领域将会有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN117016213A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311010986.6
申请日：2023-08-11
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
Abstract: 本发明提供了一种中山杉302扦插嫩枝幼化的方法及应用，属于中山杉无性繁殖技术领域。本发明的中山杉302扦插嫩枝幼化的方法包括以下步骤：中山杉302大树截干，萌发的木质化侧枝作为接穗，嫁接到2年生中山杉302实生苗砧木进行幼化；采集幼化嫁接苗上的木质化主枝作为接穗，再次嫁接到2年生中山杉302实生苗砧木重复幼化，直至获得第6代幼化嫁接苗；第6代幼化嫁接苗截干，萌发的半木质化侧枝为扦插嫩枝。本发明通过多代幼化嫁接获得扦插嫩枝，相较于未幼化插穗，生根时间由70天缩短至41天，扦插生根率由原来的32％提高达到74％以上。
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公开(公告)号：CN112646816B
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202110073795.9
申请日：2021-01-19
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N1/21 , C12N15/65 , C12N5/10 , A01H5/02 , A01H6/20 , A01H6/00 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种花器官特异表达的中山杉启动子ProThADH1及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过Genome Walking技术克隆了中山杉ThADH1基因的1717bp启动子序列，如SEQ ID NO.1所示，并采用通路克隆技术构建其Pcambia1301表达载体，进一步进行拟南芥遗传转化，通过GUS染色后，发现中山杉启动子ProThADH1具有启动子活性，且在拟南芥的花药，雄蕊，柱头中特异性的表达。因此，应用本发明提供的启动子，可以在植物基因工程中，诱导相应目的基因在植物花器官中特异表达，改良优良品种选育进程。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110551736B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201910947929.8
申请日：2019-09-30
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/06 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种与中山杉根发育相关的ThHAM1基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。所述的ThHAM1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过构建基因GbF3′H1载体转化山杨新，与对照植株相比，ThHAM1基因在山新杨中高效表达，并伴随着表型出现变异，植株生长速度减慢，以根部最为明显，不定根数量减少，长度变短，目的基因的表达量上升200‑500倍，说明ThHAM1基因是调控植物根发育和影响植物形态的重要基因，在林木基因工程领域有重要的应用价值，可以用于调整植物生长发育速度或植物形态。
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公开(公告)号：CN112029888A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010902953.2
申请日：2020-08-31
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种基于DNA条形码鉴定落羽杉属种质资源无性系的方法，属于植物无性系鉴定领域。该方法包括：提取待鉴定样品叶绿体DNA，进行PCR扩增，测序，进行构建系统进化树以及序列比对，鉴定出无性系。本发明利用叶绿体trnI-GAU-rrn16中的一段序列作为DNA条形码，该序列存在落羽杉属叶绿体基因组中基因trnI-GAU和rrn16的基因间隔区，包含较多的变异位点为多种种质资源无性系鉴定提供依据，并采用专用引物进行扩增，使得本方法能够将落羽杉属植物不同无性系进行鉴定，实现了高效，低成本，操作方便的落羽杉属种质资源无性系的鉴定，有利于提升落羽杉属种质创新效率。
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公开(公告)号：CN107384936A
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201710613030.3
申请日：2017-07-25
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种影响中山杉耐淹涝能力的ThRap2.1基因及其应用，所述的ThRap2.1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将ThRap2.1基因转入木本模式植物杨树中，过量表达ThRap2.1的转基因杨树，生长速率变慢，节间明显变短，转基因植株中ThRap2.1表达量较对照杨树高出300-600倍，且水淹胁迫下，ThRap2.1基因的表达量呈几千倍上升。说明ThRap2.1基因是植物响应水淹胁迫的重要基因，在林木基因工程领域将会有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112029888B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202010902953.2
申请日：2020-08-31
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种基于DNA条形码鉴定落羽杉属种质资源无性系的方法，属于植物无性系鉴定领域。该方法包括：提取待鉴定样品叶绿体DNA，进行PCR扩增，测序，进行构建系统进化树以及序列比对，鉴定出无性系。本发明利用叶绿体trnI‑GAU‑rrn16中的一段序列作为DNA条形码，该序列存在落羽杉属叶绿体基因组中基因trnI‑GAU和rrn16的基因间隔区，包含较多的变异位点为多种种质资源无性系鉴定提供依据，并采用专用引物进行扩增，使得本方法能够将落羽杉属植物不同无性系进行鉴定，实现了高效，低成本，操作方便的落羽杉属种质资源无性系的鉴定，有利于提升落羽杉属种质创新效率。
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公开(公告)号：CN107267549A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710547595.6
申请日：2017-07-06
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所
Abstract: 本发明公开了一种中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法，包括：1）以中山杉生长30天长势良好的组培苗幼嫩叶片为材料，对材料进行30h的黑暗预处理；2）对叶肉原生质体进行分离和纯化；3）从15~20mL过夜培养菌液抽提50~80μg质粒，质粒为载体p2FGW7.0；4）PEG介导进行原生质体转化。本发明的中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法，其操作简单易行，除可以获得大量、完整、纯净的中山杉叶肉原生质体外，还可以达到高达80%的质粒转化率。从而解决了无法深入研究中山杉基因功能的难题，也为其他针叶树种原生质体瞬时表达体系建立提供一定的参考及借鉴，将在林木基因工程领域有重要的应用价值。
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