落羽杉TdERF11基因在提高山新杨抗涝能力中的应用

    公开(公告)号:CN117165597B

    公开(公告)日:2024-07-30

    申请号:CN202310925434.1

    申请日:2023-07-26

    Abstract: 本发明公开了落羽杉TdERF11基因在提高山新杨抗涝能力中的应用,属于植物分子生物学领域。本发明以落羽杉组培苗为材料,通过克隆得到落羽杉TdERF11基因,在此基础上构建其过量表达载体pBI121‑TdERF11,转入落羽杉与山新杨中,得到转基因植株。水淹胁迫后,转TdERF11基因落羽杉植株ACC合成酶的活性与浓度明显高于对照植株。水淹实验1W后,转基因山新杨的目标基因表达量较对照植株高出300‑450倍。水淹实验3W后,转基因山新杨仍长势良好,未转基因植株叶片腐烂,植株死亡,过表达TdERF11提高了植株的抗涝能力。

    一种组培与扦插结合的落羽杉快繁方法

    公开(公告)号:CN113994819A

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202111110393.8

    申请日:2021-09-18

    Abstract: 本发明公开了一种组培与扦插结合的落羽杉快繁方法,属于植物组培技术领域。本发明方法包括以下步骤:从落羽杉优良母树上采取外植体,外植体包括嫩叶、半木质化茎段和茎尖,对外植体进行消毒后接种至愈伤诱导培养基上。经过愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、愈伤组织的诱导不定芽、伸长生长及壮苗处理以及室内扦插生根培养,即可得到大量落羽杉小苗,可直接移植栽培。本发明组织培养操作步骤简单,成本低,能够快速增殖产生大量不定芽,高效繁育大量落羽杉苗木,有利于落羽杉优良品种在市场上的推广。

    一种中山杉耐淹、耐旱有关基因ThPDC1及其应用

    公开(公告)号:CN111117992A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010051114.4

    申请日:2020-01-17

    Abstract: 本发明公开了一种中山杉耐淹、耐旱有关基因ThPDC1及其应用,属于植物基因工程技术领域。基因ThPDC1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明以中山杉406组培苗叶片为材料,通过RACE技术克隆了中山杉ThPDC1全长基因并采用GATEWAY技术构建其过量表达载体pH35GS-ThPDC1,将ThPDC1基因转入木本模式植物杨树中,转基因植株中ThPDC1表达量较对照杨树高出100-300倍,水淹胁迫下,未转基因植株生长受到抑制,转基因植株长势良好。干旱处理下,未转基因植株生长受到抑制,叶片发黄,脱落;转基因植株长势良好。

    一种野外用便携式植物水下光合作用测量装置及其同步测量光合速率和暗呼吸速率的方法

    公开(公告)号:CN114354549A

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN202210030663.2

    申请日:2022-01-11

    Abstract: 本发明公开了一种野外用便携式植物水下光合作用测量装置及其同步测量光合速率和暗呼吸速率的方法,属于植物生理学及仪器制备技术领域。本发明所提供的野外用便携式植物水下光合作用测量装置,可在实验室或野外使用,方便研究人员检测在不同的温度、光照强度、二氧化碳浓度条件下植物的水下光合效率和暗呼吸速率。本发明主要解决了现有光合速率检测方法及使用的装置无法精确测定温度、光照和CO2浓度多参数条件下植物在水下的光合速率和暗呼吸速率的问题,有助于促进科研人员对植物水下光合速率和暗呼吸速率的了解,为揭示植物在水下的生存和生长策略提供了重要的技术手段。

    一种中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法

    公开(公告)号:CN107267549B

    公开(公告)日:2021-01-05

    申请号:CN201710547595.6

    申请日:2017-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法,包括:1)以中山杉生长30天长势良好的组培苗幼嫩叶片为材料,对材料进行30h的黑暗预处理;2)对叶肉原生质体进行分离和纯化;3)从15~20mL过夜培养菌液抽提50~80μg质粒,质粒为载体p2FGW7.0;4)PEG介导进行原生质体转化。本发明的中山杉品种406叶肉原生质体分离、纯化及高效转化的方法,其操作简单易行,除可以获得大量、完整、纯净的中山杉叶肉原生质体外,还可以达到高达80%的质粒转化率。从而解决了无法深入研究中山杉基因功能的难题,也为其他针叶树种原生质体瞬时表达体系建立提供一定的参考及借鉴,将在林木基因工程领域有重要的应用价值。

    一种落羽杉根,茎,叶原生质体分离、纯化及瞬时高效转化的方法

    公开(公告)号:CN110669718A

    公开(公告)日:2020-01-10

    申请号:CN201910948163.5

    申请日:2019-09-30

    Abstract: 本发明公开了一种落羽杉根,茎,叶原生质体分离、纯化及瞬时高效转化方法,包括以下步骤:1)选择生长出1-3轮叶片的落羽杉幼苗,避光培养24h;先用75%酒精清洗1遍,再用去离子水清洗3遍,然后刀片分离落羽杉幼苗的叶片,茎段以及根部;2)使用纤维素酶和果胶酶将落羽杉根,茎,叶酶解成原生质体,并对所得到的原生质体进行分离、纯化和预处理;3)以不同组织原生质体为受体,利用PEG介导转化法将含有外源基因的瞬时表达载体转入原生质体中,经培养,使外源基因在原生质体中表达。该方法操作简单易行,可以获得大量、完整、纯净的落羽杉根,茎,叶原生质体,并且转化效率均高达50%以上,为落羽杉基因瞬时表达检测,原生质体融合等提供技术依据。

    一种研究土壤食真菌线虫取食偏好的方法

    公开(公告)号:CN105821112A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610266122.4

    申请日:2016-04-27

    CPC classification number: C12Q1/02

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体为一种研究土壤食真菌线虫对土壤中真菌取食偏好的方法,包括如下步骤:步骤(1)AM真菌孢子的分离,步骤(2)AM真菌孢子的表面消毒,步骤(3)AM真菌孢子萌发培养基的配制,步骤(4)AM真菌孢子的萌发,步骤(5)寄主离体根的培养,步骤(6)AM真菌孢子培养基的配制,步骤(7)AM真菌孢子和寄主离体根的双重培养,步骤(8)食真菌线虫取食AM真菌与其他真菌的观察,步骤(9)选择室的建立。本发明的方法简单易行,可以为食真菌线虫取食AM真菌提供直接证据,同时可以揭示食真菌线虫对土壤中真菌的取食偏好,有助于我们对土壤生态过程的全面了解。

    一种基于DNA条形码鉴定落羽杉属种质资源无性系的方法

    公开(公告)号:CN112029888B

    公开(公告)日:2024-05-24

    申请号:CN202010902953.2

    申请日:2020-08-31

    Abstract: 本发明提供了一种基于DNA条形码鉴定落羽杉属种质资源无性系的方法,属于植物无性系鉴定领域。该方法包括:提取待鉴定样品叶绿体DNA,进行PCR扩增,测序,进行构建系统进化树以及序列比对,鉴定出无性系。本发明利用叶绿体trnI‑GAU‑rrn16中的一段序列作为DNA条形码,该序列存在落羽杉属叶绿体基因组中基因trnI‑GAU和rrn16的基因间隔区,包含较多的变异位点为多种种质资源无性系鉴定提供依据,并采用专用引物进行扩增,使得本方法能够将落羽杉属植物不同无性系进行鉴定,实现了高效,低成本,操作方便的落羽杉属种质资源无性系的鉴定,有利于提升落羽杉属种质创新效率。

    一种落羽杉TdADH3基因及其表达蛋白和应用

    公开(公告)号:CN116200406A

    公开(公告)日:2023-06-02

    申请号:CN202211420639.6

    申请日:2022-11-14

    Abstract: 本发明公开了一种落羽杉TdADH3基因及其表达蛋白和应用,属于植物基因工程技术领域。本发明以落羽杉组培苗根为材料,通过RACE技术克隆了落羽杉TdADH3全长基因。同时,采用GATEWAY技术构建其过量表达载体pBWA(V)KS‑TdADH3,该基因位于启动子P35S之后,在启动子P35S的驱动下,TdADH3在杨树中高效表达。转基因植株在含100moL/LNaCl溶液中生长30天后,长势良好,生长未受明显影响,表明TdADH3基因是植物响应盐胁迫的重要基因,可见该基因在落羽杉和其它植物生产、育种中将有广泛的用途,也可为后续开展落羽杉胁迫研究提供理论依据,因此本发明具有良好的应用前景。

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