公开(公告)号：CN108753996A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810431199.1

申请日：2018-05-08

Applicant: 江苏大学

Inventor： 王强 ,  任美佳 ,  师忠港 ,  鞠小丽 ,  夏恒传 ,  刘晓勇

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/35

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种细胞支原体检测引物、试剂盒及检测方法；本发明中所述试剂盒包括PCR扩增所需要的两对引物组合，该引物组合可以特异性扩增各种支原体中的16S基因和23S基因之间约250bp序列，同时两对引物扩增保证了检测结果的准确性，试剂盒中还包括PCR扩增所需要的预先反应混合物，混合物中包括Taq酶、dNTP和缓冲液等；本发明中的试剂盒可以快速高效的区别细胞中是否存在支原体污染，检测结果准确，同时可以批量进行检测。

公开(公告)号：CN107236030A

公开(公告)日：2017-10-10

申请号：CN201710614785.5

申请日：2017-07-26

Applicant: 江苏大学

Inventor： 王强 ,  任美佳 ,  鞠小丽

IPC: C07K14/435 ,  C07K1/22 ,  C12N15/70 ,  C12N15/12

CPC classification number: C07K14/43586 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种家蚕肽聚糖识别蛋白的表达和纯化方法，属于昆虫免疫学领域。包括以下步骤：从家蚕脂肪体中提取mRNA,逆转录成cDNA,通过设计引物从cDNA中扩增家蚕肽聚糖识别蛋白S1基因，使用分子克隆的方法将家蚕肽聚糖识别蛋白S1基因克隆到PET‑30a中并转化BL21(DE3)。将含有目的基因的BL21(DE3)过夜培养，按1:100稀释菌液摇菌至OD值为0.5左右，加入终浓度0.8mMIPTG和20%葡萄糖诱导5h，离心弃上清，收集菌体。本发明所使用的原核表达系统遗传图谱明确，易于操作，节约时间，能够高水平的表达外源蛋白。

公开(公告)号：CN105779483A

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201610248847.0

申请日：2016-04-20

Applicant: 江苏大学

Inventor： 王强 ,  鞠小丽 ,  陈亮 ,  夏恒传 ,  刘晓勇 ,  陈克平

IPC: C12N15/66

CPC classification number: C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种家蚕shRNA表达载体构建方法和应用，属于昆虫病毒基因工程领域。所述的载体包括该载体启动子酶切后和家蚕RNA干扰启动子替换。所述的克隆方法包括体外合成互补的单长链DNA通过自身退火形成互补的含粘性末端的双链DNA。将酶切后的载体和双链DNA通过粘性末端连接后，通过克隆后测序验证。本发明构建的家蚕shRNA载体只需要通过体外合成单长链DNA就可以高效、快速的干扰家蚕目的基因的表达。同时可以对其它一些昆虫细胞基因进行干扰研究。