一种家蚕shRNA表达载体构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105779483A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610248847.0

    申请日:2016-04-20

    Applicant: 江苏大学

    CPC classification number: C12N15/66

    Abstract: 本发明公开了一种家蚕shRNA表达载体构建方法和应用,属于昆虫病毒基因工程领域。所述的载体包括该载体启动子酶切后和家蚕RNA干扰启动子替换。所述的克隆方法包括体外合成互补的单长链DNA通过自身退火形成互补的含粘性末端的双链DNA。将酶切后的载体和双链DNA通过粘性末端连接后,通过克隆后测序验证。本发明构建的家蚕shRNA载体只需要通过体外合成单长链DNA就可以高效、快速的干扰家蚕目的基因的表达。同时可以对其它一些昆虫细胞基因进行干扰研究。

    一种补充人体必需氨基酸的口服重组营养多肽的制备方法

    公开(公告)号:CN105349566A

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201510793140.3

    申请日:2015-11-18

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种补充人体必需氨基酸的口服重组营养多肽的制备方法,属于重组融合蛋白药物技术领域;本发明将带有肠激酶标签的营养多肽基因np整合到pJS700载体上,然后用芽孢衣壳蛋白基因cotC作为分子载体,构建融合表达的整合型重组质粒,将其转化枯草芽孢杆菌,使外源基因整合于染色体上的淀粉酶基因中,并筛选出含融合表达cotC-NP的重组枯草芽孢杆菌菌株,诱导重组菌株产生的芽孢表面展示营养多肽;本发明构建的表面展示带有肠激酶标签营养多肽的重组芽孢,可用于动物、人直接口服在肠道进行自由消化吸收,成为一种新型的口服运动营养保健品,具有广泛的应用价值;克服了BCAA来源于化学合成提取的限制,也克服了重组发酵生产营养多肽分离纯化过程复杂的缺点。

    一种家蚕核型多角体病毒免疫胶体金试纸条及检测方法

    公开(公告)号:CN104459120A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410646786.4

    申请日:2014-11-14

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种家蚕核型多角体病毒免疫胶体金检测试纸条及检测方法,具体涉及一种免疫层析技术检测家蚕核型多角体病毒的免疫胶体金诊断试纸条及其制备方法,属于病毒疫病诊断技术领域;本发明所述的免疫胶体金试纸条包括:标记抗原BmNPV-Lef4抗体的胶体金垫和包被的硝酸纤维膜,其中硝酸纤维膜上部检测线包被兔抗BmNPV-Lef4,硝酸纤维膜下部的质控线包被羊抗鼠IgG;该胶体金试纸条用于检测家蚕核型多角体病毒,与传统的胶体金检测方法相比,在胶体金检测试纸条制备时采用了双抗体夹心法,并对两种病毒抗体的浓度配比进行了调试,能够有效地保证检测结果的特异性、灵敏度和稳定性,其检测灵敏度高,检测方法简便,也是首次应用于家蚕核型多角体病毒检测中。

    一种补充人体必需氨基酸的口服重组营养多肽的制备方法

    公开(公告)号:CN105349566B

    公开(公告)日:2019-04-30

    申请号:CN201510793140.3

    申请日:2015-11-18

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种补充人体必需氨基酸的口服重组营养多肽的制备方法,属于重组融合蛋白药物技术领域;本发明将带有肠激酶标签的营养多肽基因np整合到pJS700载体上,然后用芽孢衣壳蛋白基因cotC作为分子载体,构建融合表达的整合型重组质粒,将其转化枯草芽孢杆菌,使外源基因整合于染色体上的淀粉酶基因中,并筛选出含融合表达cotC‑NP的重组枯草芽孢杆菌菌株,诱导重组菌株产生的芽孢表面展示营养多肽;本发明构建的表面展示带有肠激酶标签营养多肽的重组芽孢,可用于动物、人直接口服在肠道进行自由消化吸收,成为一种新型的口服运动营养保健品,具有广泛的应用价值;克服了BCAA来源于化学合成提取的限制,也克服了重组发酵生产营养多肽分离纯化过程复杂的缺点。

    一种家蚕核型多角体病毒免疫胶体金试纸条及检测方法

    公开(公告)号:CN104459120B

    公开(公告)日:2016-08-24

    申请号:CN201410646786.4

    申请日:2014-11-14

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种家蚕核型多角体病毒免疫胶体金检测试纸条及检测方法,具体涉及一种免疫层析技术检测家蚕核型多角体病毒的免疫胶体金诊断试纸条及其制备方法,属于病毒疫病诊断技术领域;本发明所述的免疫胶体金试纸条包括:标记抗原BmNPV?Lef4抗体的胶体金垫和包被的硝酸纤维膜,其中硝酸纤维膜上部检测线包被兔抗BmNPV?Lef4,硝酸纤维膜下部的质控线包被羊抗鼠IgG;该胶体金试纸条用于检测家蚕核型多角体病毒,与传统的胶体金检测方法相比,在胶体金检测试纸条制备时采用了双抗体夹心法,并对两种病毒抗体的浓度配比进行了调试,能够有效地保证检测结果的特异性、灵敏度和稳定性,其检测灵敏度高,检测方法简便,也是首次应用于家蚕核型多角体病毒检测中。

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